| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-34页 |
| 1 老年性痴呆症 | 第12-14页 |
| ·概述 | 第12页 |
| ·AD的主要病理特征 | 第12-14页 |
| ·神经纤维缠结(neurofibrillary tangles,NFT) | 第13页 |
| ·淀粉样斑(amyloid plaques) | 第13-14页 |
| 2 Aβ级联假说(Aβ cascade hypothesis) | 第14-19页 |
| ·Aβ的产生 | 第14-15页 |
| ·Aβ的毒性 | 第15-17页 |
| ·Aβ级联假说 | 第17-19页 |
| 3 影响APP切割的三种分泌酶 | 第19-32页 |
| ·α-分泌酶 | 第19页 |
| ·β-分泌酶 | 第19-26页 |
| ·BACE1的基因结构 | 第20-21页 |
| ·BACE1的蛋白结构 | 第21-22页 |
| ·BACE1的转录调控 | 第22-23页 |
| ·BACE1的翻译后修饰、转运和代谢 | 第23-25页 |
| ·BACE1的生物学功能 | 第25-26页 |
| ·γ-分泌酶 | 第26-32页 |
| 4 脑缺氧/缺血与老年性痴呆 | 第32-33页 |
| 5 本论文的研究内容与研究意义 | 第33-34页 |
| 第二章 材料与方法 | 第34-51页 |
| 1 材料 | 第34-37页 |
| ·细胞株及菌种 | 第34页 |
| ·质粒和载体 | 第34页 |
| ·基因敲除小鼠 | 第34页 |
| ·试剂 | 第34-37页 |
| ·培养基 | 第34-35页 |
| ·琼脂糖凝胶 | 第35页 |
| ·RIPA裂解液 | 第35页 |
| ·胶迁移缓冲液 | 第35页 |
| ·免疫印迹(Western blot)所需试剂 | 第35-36页 |
| ·Aβ免疫沉淀检测法所需试剂 | 第36-37页 |
| ·其它所需试剂和材料 | 第37页 |
| 2 实验方法 | 第37-51页 |
| ·细胞培养、缺氧处理 | 第37-38页 |
| ·免疫印迹(Western blot) | 第38-39页 |
| ·瞬时转染 | 第39-40页 |
| ·Aβ的检测 | 第40-41页 |
| ·Pulse-chase分析 | 第41-42页 |
| ·生物信息学分析 | 第42-43页 |
| ·荧光素酶活性分析 | 第43-45页 |
| ·电泳迁移率变动分析(Electrophoresis Mobility Shift Assay,EMSA) | 第45-47页 |
| ·体外β-分泌酶活性检测 | 第47-48页 |
| ·总RNA的提取 | 第48页 |
| ·实时荧光定量PCR(Real-time PCR,RT-PCR) | 第48-49页 |
| ·HIF-1α RNA干扰 | 第49-51页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第51-67页 |
| 1 BACE1的转录调控 | 第51-61页 |
| ·急性缺氧上调BACE1的蛋白水平和活性并增加Aβ的分泌 | 第51-53页 |
| ·急性缺氧通过上调BACE1的转录使其生物合成水平增加 | 第53-55页 |
| ·BACE1启动子上HIF-1α结合位点的鉴定 | 第55-57页 |
| ·HIF-1α调节BACE1的表达水平 | 第57-58页 |
| ·HIF-1在缺氧诱导效应中起主要作用 | 第58-61页 |
| 2 nicastrin基因的转录调控 | 第61-67页 |
| ·nicastrin基因启动子的克隆与功能性分析 | 第61-63页 |
| ·nicastrin启动子的生物信息学预测分析 | 第61页 |
| ·nicastrin基因启动子的克隆与功能性分析 | 第61-63页 |
| ·nicastrin启动子上转录因子结合位点的鉴定 | 第63-67页 |
| 第四章 讨论与展望 | 第67-71页 |
| 参考文献 | 第71-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
