| 中文摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-28页 |
| 1. 海葵神经毒素 | 第10-13页 |
| ·来源及分类 | 第10-11页 |
| ·氨基酸序列 | 第11-12页 |
| ·理化性质 | 第12页 |
| ·海葵神经毒素rhk2a 的重组表达及分离纯化 | 第12-13页 |
| ·强心活性研究 | 第13页 |
| 2. 多肽和蛋白药物的PEG 修饰 | 第13-26页 |
| ·mPEG 修饰原理及在生物医药领域的应用 | 第14-15页 |
| ·PEG 的结构与基本生物学性质 | 第15-16页 |
| ·mPEG 修饰反应的类型 | 第16-21页 |
| ·PEG 修饰蛋白质的反应过程 | 第21页 |
| ·PEG 修饰蛋白质的反应方案设计 | 第21-23页 |
| ·PEG 修饰蛋白质的分析与分离方法 | 第23-26页 |
| 3. 本课题的研究目的和研究内容 | 第26-28页 |
| ·研究目的 | 第26-27页 |
| ·研究内容 | 第27-28页 |
| 第一章 mPEG 对海葵神经毒素 rhk2a 的修饰 | 第28-52页 |
| 1. 引言 | 第28-30页 |
| ·修饰反应试验设计 | 第28-29页 |
| ·修饰反应流程 | 第29-30页 |
| 2. 材料与仪器 | 第30-31页 |
| ·主要材料 | 第30-31页 |
| ·仪器 | 第31页 |
| 3. 实验方法 | 第31-38页 |
| ·检测方法 | 第31-36页 |
| ·mPEG 修饰海葵神经毒素rhk2a | 第36-38页 |
| 4. 实验结果 | 第38-49页 |
| ·反向高效液相(PR-HPLC)检测重组海葵神经毒素 rhk2a 蛋白浓度 | 第38-41页 |
| ·RP-HPLC 法蛋白浓度测定与BCA 法蛋白浓度测定结果比较 | 第41-42页 |
| ·各反应条件对修饰反应的影响考察 | 第42-49页 |
| 5. 小结 | 第49-50页 |
| ·反向高效液相（RP-HPLC）检测重组海葵神经毒素rhk2a 蛋白浓度 | 第49页 |
| ·mPEG 修饰rhk2a 反应的单因素影响考察 | 第49页 |
| ·mPEG 修饰rhk2a 反应的正交试验 | 第49-50页 |
| 6. 讨论 | 第50-52页 |
| ·采用反向高效液相（RP-HPLC）检测rhk2a 蛋白浓度方法 | 第50页 |
| ·采用RP-HPLC 法检测修饰产物组成 | 第50-51页 |
| ·mPEG 修饰rhk2a 反应 | 第51-52页 |
| 第二章 mPEG 对 rhk2a 修饰产物的分离纯化 | 第52-65页 |
| 1. 引言 | 第52-53页 |
| ·修饰产物分离纯化试验设计 | 第52-53页 |
| ·修饰产物的分离纯化流程 | 第53页 |
| 2. 材料与仪器 | 第53-54页 |
| ·主要材料 | 第53页 |
| ·仪器 | 第53-54页 |
| 3. 实验方法 | 第54-57页 |
| ·主要溶液配制 | 第54-55页 |
| ·起始缓冲液的 pH 值选择 | 第55页 |
| ·SP-650S 强阳离子交换层析法分离修饰产物 | 第55-56页 |
| ·CM-650S 弱阳离子交换层析法分离修饰产物 | 第56页 |
| ·冻干浓缩 | 第56页 |
| ·分离产物 Tris-Tricine 系统 SDS-PAGE 电泳检测 | 第56-57页 |
| 4. 实验结果 | 第57-62页 |
| ·SP-650S 强阳离子交换层析柱料起始 pH 值的选择 | 第57页 |
| ·CM-650S 弱阳离子交换层析柱料起始 pH 值的选择 | 第57-58页 |
| ·SP-650S 强阳离子交换层析法分离修饰产物 | 第58-61页 |
| ·CM 弱阳离子交换层析法分离修饰产物 | 第61-62页 |
| 5. 小结 | 第62-63页 |
| ·离子交换层析柱料起始pH 值的选择 | 第62页 |
| ·SP-650S 强阳离子交换层析法分离修饰产物 | 第62-63页 |
| ·CM-650S 弱阳离子交换层析法分离修饰产物 | 第63页 |
| 6. 讨论 | 第63-65页 |
| ·mPEG-rhk2a 修饰产物分离纯化的方法 | 第63-64页 |
| ·离子交换层析柱料起始pH 值的选择 | 第64页 |
| ·SP-650S 强阳离子交换层析法分离修饰产物 | 第64页 |
| ·CM-650S 弱阳离子交换层析法分离修饰产物 | 第64-65页 |
| 第三章 mPEG 对海葵神经毒素 rhk2a 修饰产物 的性质研究 | 第65-80页 |
| 1. 引言 | 第65页 |
| 2. 材料与仪器 | 第65-66页 |
| ·主要材料 | 第65-66页 |
| ·仪器 | 第66页 |
| ·实验动物 | 第66页 |
| 3. 实验方法 | 第66-68页 |
| ·RP-HPLC 分析修饰产物的纯度 | 第66页 |
| ·质谱测定分子量 | 第66页 |
| ·稳定性的初步研究 | 第66-67页 |
| ·强心活性研究 | 第67-68页 |
| 4. 实验结果 | 第68-77页 |
| ·RP-HPLC 分析修饰产物的纯度 | 第68页 |
| ·质谱测定分子量 | 第68-69页 |
| ·稳定性的初步研究 | 第69-71页 |
| ·强心活性研究 | 第71-77页 |
| 5. 小结 | 第77-78页 |
| ·RP-HPLC 分析修饰产物的纯度 | 第77页 |
| ·质谱测定分子量 | 第77页 |
| ·稳定性的初步考察 | 第77页 |
| ·强心活性研究 | 第77-78页 |
| 6. 讨论 | 第78-80页 |
| ·RP-HPLC 分析修饰产物的纯度 | 第78页 |
| ·质谱测定分子量 | 第78页 |
| ·稳定性的初步考察 | 第78页 |
| ·强心活性研究 | 第78-80页 |
| 总结与展望 | 第80-82页 |
| 参考文献 | 第82-87页 |
| 附录一 攻读硕士学位期间的成果 | 第87-88页 |
| 附录二 缩写词中英文对照 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
