摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
英文缩略词表 | 第10-11页 |
前言 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-26页 |
1 猪流感病毒特性 | 第12页 |
2 猪流感病毒编码蛋白及其功能 | 第12-16页 |
·HA蛋白 | 第13-14页 |
·NA蛋白 | 第14-15页 |
·NP蛋白 | 第15页 |
·聚合酶蛋白 | 第15-16页 |
·基质蛋白(M) | 第16页 |
·非结构蛋白 | 第16页 |
3 猪流感流行病学 | 第16-19页 |
4 猪流感病毒的种间传播 | 第19-20页 |
5 猪流感病毒的诊断 | 第20页 |
6 猪流感病毒疫苗研制 | 第20-26页 |
·猪流感灭活疫苗 | 第20-21页 |
·重组猪流感病毒活载体疫苗研究 | 第21-22页 |
·表位疫苗及其研究 | 第22-26页 |
第二章 试验部分 | 第26-48页 |
试验一 猪流感HA基因表位抗原串联表达 | 第26-38页 |
1 材料 | 第26-27页 |
·菌株与质粒 | 第26页 |
·主要试剂 | 第26页 |
·主要仪器 | 第26-27页 |
2 方法 | 第27-32页 |
·重组表达质粒pET-30a-EP1的构建 | 第27-28页 |
·表达载体pET-03a-PEI质粒提取及转化BL12(DE3) | 第28-29页 |
·重组质粒在大肠杆菌BL21中的诱导表达 | 第29页 |
·SDS-PAGE检测重组蛋白的表达 | 第29页 |
·Western blot检测重组蛋白的表达 | 第29-30页 |
·重组蛋白的纯化 | 第30-31页 |
·纯化蛋白的检测及定量 | 第31-32页 |
3 结果 | 第32-35页 |
·重组表达质粒pET-30a-Ep1的构建 | 第32页 |
·重组质粒在大肠杆菌BL21中的诱导表达 | 第32-33页 |
·Western blot | 第33-34页 |
·重组蛋白纯化后的蛋白电泳 | 第34页 |
·BCA蛋白定量结果 | 第34-35页 |
4 讨论 | 第35-38页 |
试验二 重组表达蛋白小鼠免疫活性研究 | 第38-48页 |
1 材料 | 第38-39页 |
·主要仪器 | 第38页 |
·实验动物 | 第38页 |
·主要试剂 | 第38页 |
·试剂配制 | 第38-39页 |
2 方法 | 第39-42页 |
·试验动物分组及动物免疫 | 第39-40页 |
·间接ELISA的操作程序 | 第40页 |
·1%的红细胞制备方法 | 第40-41页 |
·SIV病毒的灭活 | 第41页 |
·MTT增殖试验 | 第41-42页 |
·统计学分析 | 第42页 |
3 结果 | 第42-46页 |
·皮下免疫小鼠血清IgG抗体水平的检测 | 第42页 |
·滴鼻免疫小鼠血清IgG抗体水平的检测 | 第42-43页 |
·滴鼻免疫小鼠粘膜IgA抗体水平的检测 | 第43-44页 |
·抗猪流感病毒特异性HI抗体检测 | 第44页 |
·T淋巴细胞增殖试验 | 第44-46页 |
4 讨论 | 第46-48页 |
结论 | 第48-49页 |
创新点 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-56页 |
附录:常用试剂的配制 | 第56-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
课题来源:上海市科委农医重点项目 | 第61-62页 |
作者简介 | 第62-63页 |
石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表 | 第63页 |