| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-21页 |
| ·甲基对硫磷简介 | 第13页 |
| ·甲基对硫磷的理化性质 | 第13页 |
| ·甲基对硫磷的的作用及危害 | 第13页 |
| ·甲基对硫磷的微生物降解途径及降解机理 | 第13-16页 |
| ·甲基对硫磷的初级代谢 | 第14页 |
| ·PNP 的降解途径 | 第14-16页 |
| ·甲基对硫磷微生物降解的研究现状 | 第16-18页 |
| ·细菌对甲基对硫磷的降解 | 第16-17页 |
| ·真菌对甲基对硫磷的降解 | 第17页 |
| ·甲基对硫磷水解酶研究进展 | 第17-18页 |
| ·有机磷农药降解菌的应用 | 第18页 |
| ·有机磷农药降解酶的应用 | 第18-19页 |
| ·问题和前景展望 | 第19页 |
| ·研究内容,目的及意义 | 第19-20页 |
| ·技术路线 | 第20-21页 |
| 2 材料和方法 | 第21-35页 |
| ·材料与试剂 | 第21-23页 |
| ·实验材料 | 第21页 |
| ·实验仪器 | 第21页 |
| ·试剂，工具酶 | 第21页 |
| ·溶液 | 第21-23页 |
| ·培养基 | 第23页 |
| ·试验方法 | 第23-35页 |
| ·甲基对硫磷降解菌的筛选与鉴定 | 第23-27页 |
| ·甲基对硫磷水解酶基因的克隆 | 第27-31页 |
| ·甲基对硫磷水解酶基因（ophc3）的原核表达 | 第31-33页 |
| ·甲基对硫磷水解酶的酶学性质研究 | 第33-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-48页 |
| ·甲基对硫磷降解菌的分离 | 第35页 |
| ·甲基对硫磷降解菌的鉴定 | 第35-36页 |
| ·甲基对硫磷水解酶基因的克隆 | 第36-40页 |
| ·酶切后的基因组 DNA 片段和pUC19 载体的连接转化 | 第36页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第36-37页 |
| ·甲基对硫磷水解酶基因全序列的获得 | 第37-40页 |
| ·甲基对硫磷水解酶基因的原核表达 | 第40-43页 |
| ·重组质粒的构建 | 第40-42页 |
| ·有机磷降解酶基因ophc3 在大肠杆菌中的诱导表达 | 第42-43页 |
| ·甲基对硫磷水解酶（OPHC3）酶学性质分析 | 第43-48页 |
| ·甲基对硫磷水解酶（OPHC3）的纯化 | 第43-44页 |
| ·甲基对硫磷水解酶（OPHC3）反应初速度的测定 | 第44页 |
| ·甲基对硫磷水解酶（OPHC3）Km和Vm的测定 | 第44页 |
| ·OPHC3 的最适pH 和pH 稳定性 | 第44-46页 |
| ·OPHC3 酶反应最适温度和热稳定性 | 第46-47页 |
| ·不同金属离子及化学试剂对 OPHC3 酶反应的影响 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-51页 |
| ·甲基对硫磷降解菌的筛选 | 第48页 |
| ·甲基对硫磷水解酶基因的克隆 | 第48-49页 |
| ·甲基对硫磷水解酶的原核表达 | 第49页 |
| ·甲基对硫磷水解酶的酶学性质分析 | 第49-51页 |
| 5 结论 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 附表 | 第58-59页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第59页 |
