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串联亲和纯化与质谱技术对Mde4、Swi5、Sfr1蛋白复合物的鉴定

提要第1-8页
第一篇 前言第8-11页
第二篇 文献综述第11-26页
 第一章 粘附素(COHESIN)、凝集素(CONDENSIN)、分离酶(SEPARASE)及AURORA激酶等对染色体分离的调节第11-16页
  1 染色体的粘着第11-12页
  2 染色体的凝集第12-13页
  3 分离酶及其活性调控第13-14页
  4 姐妹染色体的双向定位第14-15页
  5 姐妹染色体分离的调节第15-16页
  6 减数分裂过程中染色体的分离第16页
 第二章 有丝分裂纺缍体第16-19页
  1 纺缍体装配的分子机制第18-19页
 第三章 细胞分裂过程中的同源重组及其与染色体分离的关系第19-23页
  1 减数分裂过程中rec 基因的表达第20页
  2 减数分裂时的同源重组第20-22页
  3 姐妹染色体的粘附,重组和分离第22页
  4 无同源基因重组发生的减数分裂期染色体分离第22-23页
 第四章 染色体不稳定性与肿瘤的关系第23-26页
第三篇 实验研究第26-55页
 第一章 MDE4(SPBC681.04)、SW15(SPBC409.03)、SFR1(SPBC28F2.07)融合蛋白的构建第26-39页
  1 实验材料第26-28页
   ·设备第26-27页
   ·试剂第27页
   ·菌株第27页
   ·培养基第27-28页
  2 实验方法第28-33页
  3 实验结果第33-38页
   ·pTAPKan1 质粒的构建第33页
   ·Mde4、Swi5、Sfr1终止密码子上、下游基因的扩增第33页
   ·Mde4、Swi5、Sfr1终止密码子上、下游基因的连接第33页
   ·Mde4、Swi5、Sfr1重组质粒的构建第33页
   ·克隆PCR 证实Mde4、Swi5、Sfr1在C 末端标记TAP第33-38页
  4 讨论第38-39页
 第二章 MDE4、SWI5、SFR1 蛋白纯化及质谱分析第39-55页
  1 实验材料第40-42页
   ·设备第40-41页
   ·培养基第41页
   ·主要试剂第41-42页
  2 实验方法第42-46页
   ·Western Blot 检测转染后TAP 标记蛋白表达情况第42-44页
   ·Mde4、Swi5、Sfr1 蛋白纯化第44-45页
   ·质谱分析第45-46页
   ·蛋白质组学分析第46页
  3 结果第46-51页
  4 讨论第51-55页
第四篇 结论第55-56页
课题创新性总结第56-57页
参考文献第57-72页
附录第72-82页
攻读博士期间发表的论文及获奖情况第82-83页
致谢第83-84页
中文摘要第84-86页
ABSTRACT第86-88页

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