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稀有鮈鲫性别分化相关基因的克隆与分析

中文摘要第1-6页
Abstract第6-11页
1.前言第11-18页
   ·鱼类的性别决定与分化第11-16页
     ·性别决定与分化概述第11-12页
     ·鱼类性别决定模式及其研究方法第12-14页
     ·性别分化相关基因研究进展第14-16页
   ·稀有鮈鲫——理想的实验动物模型第16-17页
     ·稀有鮈鲫的生物学特征第16-17页
     ·稀有鮈鲫性别相关研究进展第17页
   ·本研究立题的必要性第17-18页
2.材料和方法第18-29页
   ·实验材料及引物序列第18-19页
   ·主要仪器设备第19页
   ·主要试剂第19-20页
   ·实验方法第20-29页
     ·实验鱼的激素处理及杂交试验第20页
     ·RNA的提取第20-22页
     ·DNA的提取第22页
     ·cDNA第一链的合成第22页
     ·RT-PCR扩增基因cDNA片段第22-23页
     ·纯化PCR产物第23页
     ·感受态细胞的制备第23-24页
     ·目的DNA片段与pMD 18-T载体的连接第24页
     ·转化及筛选第24页
     ·转基因质粒的提取、酶切及纯化第24-25页
     ·RACE-PCR克隆基因全长第25-27页
     ·序列分析第27页
     ·RT-PCR表达检测与分析第27-28页
     ·胚胎显微注射及转基因稀有鮈鲫的检测第28-29页
3.结果第29-60页
   ·稀有鮈鲫两种芳香化酶基因cDNA的克隆及序列分析第29-42页
     ·Cyp19a、Cyp19b基因片段的克隆第29-31页
     ·RACE-PCR扩增Cyp19a、Cyp19b的全长第31-36页
     ·Cyp19a、Cyp19b的cDNA序列分析第36-42页
   ·稀有鮈鲫dmrt1基因EDNA的克隆及序列分析第42-48页
     ·RACE-PCR扩增dmrt1基因全长第42-45页
     ·dmrt1基因的cDNA序列分析第45-48页
   ·Cyp19a、Cyp19b及dmrt1基因的表达模式分析第48-55页
     ·Cyp19a、Cyp19b及dmrt1基因的组织表达分析第48-50页
     ·Cyp19a、Cyp19b及dmrt1基因在胚胎发育早期的表达分析第50-52页
     ·Cyp19a、Cyp19b及dmrt1基因在单个幼鱼发育过程中的表达分析第52-55页
   ·稀有鮈鲫性别决定模式的研究第55-57页
     ·激素处理性反转稀有鮈鲫的获得第55-56页
     ·杂交试验结果第56-57页
   ·转Cyp19a-GFP基因鱼获得第57-60页
4.讨论第60-66页
   ·稀有鮈鲫Cyp19a、Cyp19b、dmrt1的序列分析第60页
   ·稀有鮈鲫Cyp19a、Cyp19b、dmrt1的表达分析第60-64页
     ·Cyp19a的表达分析第60-61页
     ·Cyp19b的表达分析第61-63页
     ·dmrt1的表达分析第63-64页
   ·转Cyp19a-GFP稀有鮈鲫第64页
   ·稀有鮈鲫的性别决定模式第64-66页
参考文献第66-75页
在校期间论文发表情况第75-76页
致谢第76页

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