中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
1.前言 | 第11-18页 |
·鱼类的性别决定与分化 | 第11-16页 |
·性别决定与分化概述 | 第11-12页 |
·鱼类性别决定模式及其研究方法 | 第12-14页 |
·性别分化相关基因研究进展 | 第14-16页 |
·稀有鮈鲫——理想的实验动物模型 | 第16-17页 |
·稀有鮈鲫的生物学特征 | 第16-17页 |
·稀有鮈鲫性别相关研究进展 | 第17页 |
·本研究立题的必要性 | 第17-18页 |
2.材料和方法 | 第18-29页 |
·实验材料及引物序列 | 第18-19页 |
·主要仪器设备 | 第19页 |
·主要试剂 | 第19-20页 |
·实验方法 | 第20-29页 |
·实验鱼的激素处理及杂交试验 | 第20页 |
·RNA的提取 | 第20-22页 |
·DNA的提取 | 第22页 |
·cDNA第一链的合成 | 第22页 |
·RT-PCR扩增基因cDNA片段 | 第22-23页 |
·纯化PCR产物 | 第23页 |
·感受态细胞的制备 | 第23-24页 |
·目的DNA片段与pMD 18-T载体的连接 | 第24页 |
·转化及筛选 | 第24页 |
·转基因质粒的提取、酶切及纯化 | 第24-25页 |
·RACE-PCR克隆基因全长 | 第25-27页 |
·序列分析 | 第27页 |
·RT-PCR表达检测与分析 | 第27-28页 |
·胚胎显微注射及转基因稀有鮈鲫的检测 | 第28-29页 |
3.结果 | 第29-60页 |
·稀有鮈鲫两种芳香化酶基因cDNA的克隆及序列分析 | 第29-42页 |
·Cyp19a、Cyp19b基因片段的克隆 | 第29-31页 |
·RACE-PCR扩增Cyp19a、Cyp19b的全长 | 第31-36页 |
·Cyp19a、Cyp19b的cDNA序列分析 | 第36-42页 |
·稀有鮈鲫dmrt1基因EDNA的克隆及序列分析 | 第42-48页 |
·RACE-PCR扩增dmrt1基因全长 | 第42-45页 |
·dmrt1基因的cDNA序列分析 | 第45-48页 |
·Cyp19a、Cyp19b及dmrt1基因的表达模式分析 | 第48-55页 |
·Cyp19a、Cyp19b及dmrt1基因的组织表达分析 | 第48-50页 |
·Cyp19a、Cyp19b及dmrt1基因在胚胎发育早期的表达分析 | 第50-52页 |
·Cyp19a、Cyp19b及dmrt1基因在单个幼鱼发育过程中的表达分析 | 第52-55页 |
·稀有鮈鲫性别决定模式的研究 | 第55-57页 |
·激素处理性反转稀有鮈鲫的获得 | 第55-56页 |
·杂交试验结果 | 第56-57页 |
·转Cyp19a-GFP基因鱼获得 | 第57-60页 |
4.讨论 | 第60-66页 |
·稀有鮈鲫Cyp19a、Cyp19b、dmrt1的序列分析 | 第60页 |
·稀有鮈鲫Cyp19a、Cyp19b、dmrt1的表达分析 | 第60-64页 |
·Cyp19a的表达分析 | 第60-61页 |
·Cyp19b的表达分析 | 第61-63页 |
·dmrt1的表达分析 | 第63-64页 |
·转Cyp19a-GFP稀有鮈鲫 | 第64页 |
·稀有鮈鲫的性别决定模式 | 第64-66页 |
参考文献 | 第66-75页 |
在校期间论文发表情况 | 第75-76页 |
致谢 | 第76页 |