| 中文摘要 | 第1-16页 |
| 英文摘要 | 第16-22页 |
| 符号说明 | 第22-25页 |
| 论文正文 | 第25-104页 |
| 前言 | 第25-33页 |
| 第一部分:细胞端粒酶活性检测及外源hTERT启动子活性检测 | 第33-46页 |
| 材料与方法 | 第34-42页 |
| 1.材料 | 第34-38页 |
| 2.方法 | 第38-42页 |
| ·细胞培养 | 第38-39页 |
| ·各细胞株端粒酶活性检测 | 第39-40页 |
| ·人端粒酶逆转录酶启动子(hTERTp)在各细胞株启动标志基因(luc)的活性检测 | 第40-42页 |
| 结果 | 第42-44页 |
| 1.细胞端粒酶活性检测 | 第42页 |
| 2.pGL3-hTERT-luc分别转染肿瘤细胞和正常细胞，双荧光素酶活性的测定 | 第42-44页 |
| 讨论 | 第44-45页 |
| 第一部分总结 | 第45-46页 |
| 第二部分:hTERT启动子介导的人ODC、SAMDC反义腺病毒载体的分别构建 | 第46-77页 |
| 材料与方法 | 第47-63页 |
| 1.材料 | 第47-48页 |
| 2.方法 | 第48-63页 |
| 腺病毒构建流程图 | 第49-50页 |
| ·ODC、SAMDC基因序列调取 | 第50-51页 |
| ·pGL3-hTERT-ODC和pGL3-hTERT-SAMDC质粒载体的构建及鉴定 | 第51-55页 |
| ·pAdTrack-hTERT-ODC和pAdTrack-hTERT-SAMDC病毒穿梭质粒载体的构建及鉴定 | 第55-57页 |
| ·pAdeasy-hTERT-ODC和pAdeasy-hTERT-SAMDC腺病毒重组载体的构建 | 第57-58页 |
| ·rAd-hTERT-ODC和rAd-hTERT-SAMDC重组腺病毒的包装和扩增 | 第58-63页 |
| 结果 | 第63-76页 |
| 1.pGL3-hTERT-ODC和pGL3-hTERT-SAMDC质粒的鉴定 | 第63-69页 |
| 2.穿梭质粒pAdTrack-hTERT-ODC和pAdTrack-hTERT-SAMDC的酶切鉴定 | 第69-70页 |
| 3.重组质粒pAd-hTERT-ODC和pAd-hTERT-SAMDC的鉴定 | 第70-71页 |
| 4.腺病毒的包装扩增及滴度测定结果 | 第71-74页 |
| 5.重组腺病毒的PCR鉴定 | 第74-76页 |
| 讨论 | 第76页 |
| 第二部分总结 | 第76-77页 |
| 第三部分:两组反义腺病毒载体靶向性抑制肿瘤细胞增殖作用的研究 | 第77-104页 |
| 材料和方法 | 第78-87页 |
| 1.材料 | 第78-81页 |
| 2.方法 | 第81-87页 |
| ·重组腺病毒rAd-hTERT-ODC/SAMDC感染效率的测定 | 第81-82页 |
| ·MTS细胞活力检测 | 第82页 |
| ·细胞裂解 | 第82页 |
| ·BCA试剂盒测定融合蛋白浓度 | 第82-83页 |
| ·SDS-PAGE | 第83-84页 |
| ·Western blotting鉴定表达蛋白 | 第84-85页 |
| ·细胞周期的检测 | 第85-86页 |
| ·基底膜侵袭实验 | 第86页 |
| ·统计学分析 | 第86-87页 |
| 结果 | 第87-101页 |
| 1.rAd-hTERT-ODC/SAMDC感染效率 | 第87-88页 |
| 2.Western blot鉴定ODC和SAMDC蛋白表达 | 第88-90页 |
| 3.MTS细胞生长曲线 | 第90-94页 |
| 4.rAd-hTERT-ODC/SAMDC对细胞周期影响 | 第94-98页 |
| 5.重组腺病毒对肿瘤细胞体外侵袭能力的影响 | 第98-101页 |
| 讨论 | 第101-103页 |
| 第三部分总结 | 第103-104页 |
| 其它附图 | 第104-110页 |
| 全文总结 | 第110-111页 |
| 参考文献 | 第111-121页 |
| 博士在读期间发表的SCI文章 | 第121-122页 |
| 致谢 | 第122-123页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第123-124页 |
| 附两篇英文文章 | 第124-153页 |
