| 摘要 | 第1-13页 |
| Abstract | 第13-15页 |
| 缩写词及英汉对照 | 第15-16页 |
| 前言 | 第16-28页 |
| 1、立题依据及意义 | 第16-17页 |
| 2、真姬菇概况 | 第17-18页 |
| 3、热激蛋白与热激蛋白70 | 第18-25页 |
| ·热激蛋白研究历史及现状 | 第18-19页 |
| ·HSPs 结构上特点 | 第19页 |
| ·HSPs 分类 | 第19-20页 |
| ·热激蛋白的功能 | 第20-23页 |
| ·热激蛋白70 研究进展 | 第23-25页 |
| 4、全长基因克隆方法的研究进展 | 第25-28页 |
| ·电子克隆 | 第25-26页 |
| ·RACE 技术 | 第26-27页 |
| ·筛选cDNA 文库 | 第27-28页 |
| 1. 真姬菇HmHSP70 基因的克隆及序列分析 | 第28-57页 |
| ·试验材料和方法 | 第28-43页 |
| ·试验材料 | 第28-29页 |
| ·试验培养基 | 第29页 |
| ·试剂 | 第29页 |
| ·仪器 | 第29-30页 |
| ·常用溶液的配制 | 第30-31页 |
| ·菌种培养及保存 | 第31页 |
| ·试验方法 | 第31-43页 |
| ·试验结果与分析 | 第43-54页 |
| ·真姬菇基因组DNA 提取及鉴定 | 第43-44页 |
| ·真姬菇Hm HSP70 基因部分片段的PCR 扩增 | 第44-45页 |
| ·扩增条件的优化 | 第45页 |
| ·真姬菇HSP70 基因部分片段的转化 | 第45页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第45-46页 |
| ·序列测定与分析 | 第46-48页 |
| ·特异引物的鉴定 | 第48页 |
| ·RNA 提取 | 第48-49页 |
| ·3’RACE 和5’RACE 扩增真姬菇HmHSP70 3’末端和5’末端 | 第49页 |
| ·Hm HSP70 全序列的拼接 | 第49-51页 |
| ·真姬菇Hm HSP70 基因完整ORF 的扩增 | 第51-54页 |
| ·讨论 | 第54-57页 |
| ·真姬菇菌丝体总RNA 的提取 | 第54-55页 |
| ·PCR 与RACE 技术的应用 | 第55-57页 |
| 2. 真姬菇HmHSP70 基因原核表达及耐热功能研究 | 第57-65页 |
| ·试验材料和方法 | 第57-60页 |
| ·试验材料 | 第57页 |
| ·试验仪器 | 第57页 |
| ·常用溶液的配制 | 第57-58页 |
| ·试验方法 | 第58-60页 |
| ·结果与分析 | 第60-63页 |
| ·Hm HSP70 基因在大肠杆菌BL21 中的表达 | 第60-61页 |
| ·异源表达HmHSP70 基因提高大肠杆菌在高温胁迫下的生存能力 | 第61-63页 |
| ·讨论 | 第63-65页 |
| 3. 真姬菇Hm HSP70 基因的生物信息学分析 | 第65-75页 |
| ·材料与方法 | 第65页 |
| ·试验序列 | 第65页 |
| ·真姬菇Hm HSP70 核酸序列分析 | 第65页 |
| ·真姬菇Hm HSP70 蛋白序列分析 | 第65页 |
| ·同源性分析及系统发育分析 | 第65页 |
| ·结果与分析 | 第65-74页 |
| ·核酸序列分析结果 | 第65-66页 |
| ·氨基酸序列分析 | 第66-68页 |
| ·同源性分析及系统进化分析 | 第68-74页 |
| ·讨论 | 第74-75页 |
| ·HSP70 与生物进化 | 第74页 |
| ·生物信息学在分子生物学中的应用 | 第74-75页 |
| 结论 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-81页 |
| 附录 | 第81-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
