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小麦蛋白质二硫键异构酶基因的原核表达及DsbA辅助LMW-GS的功能鉴定研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
第一章 文献综述第12-22页
   ·蛋白质二硫键异构酶第12-17页
     ·蛋白质二硫键第12页
     ·PDI 家族的成员第12-13页
     ·PDI第13-16页
     ·DsbA第16页
     ·PDI 家族的其它成员第16-17页
     ·PDI 家族的结构特征第17页
   ·小麦低分子量麦谷蛋白研究进展第17-21页
     ·低分子量麦谷蛋白的分类第17-18页
     ·低分子量谷蛋白亚基分子的Cys 的分布及其结构第18-19页
     ·低分子量麦谷蛋白的染色体定位第19页
     ·谷蛋白聚合体的构成第19-20页
     ·低分子量谷蛋白对加工品质的影响第20页
     ·低分子量谷蛋白亚基体外功能鉴定研究第20-21页
   ·本研究的目的和意义第21-22页
第二章 小麦“陕253”PDI 基因原核表达及蛋白纯化第22-36页
   ·材料第22-24页
     ·供试材料第22页
     ·溶液的配制第22-23页
     ·仪器第23-24页
   ·实验方法第24-30页
     ·引物设计第24页
     ·小麦总RNA 的提取第24-25页
     ·目的基因的扩增第25页
     ·目的片段的回收纯化第25-26页
     ·目的片段的克隆第26页
     ·表达载体的构建第26-28页
     ·重组质粒的诱导表达第28-29页
     ·重组蛋白的Western blot 分析第29-30页
     ·重组蛋白的纯化第30页
   ·结果与分析第30-34页
     ·PDI 基因的克隆第30-31页
     ·目的片段的序列分析第31-32页
     ·表达载体的构建和重组质粒的鉴定第32-33页
     ·融合基因的诱导表达和纯化第33-34页
   ·讨论第34-36页
第三章 LMW/DsbA 双顺反子表达载体构建、原核表达及亚基品质效应鉴定第36-46页
   ·材料第36页
     ·供试材料第36页
     ·溶液的配制第36页
     ·仪器第36页
   ·实验方法第36-40页
     ·引物设计第36页
     ·基因组DNA 的提取第36-37页
     ·目的基因的扩增与目的片段的回收第37-38页
     ·目的片段的克隆及其序列分析第38-40页
     ·重组质粒的诱导表达第40页
     ·重组蛋白的纯化第40页
     ·重组蛋白的功能鉴定第40页
   ·结果与分析第40-45页
     ·融合基因LMW/DsbA 的克隆及其序列分析第40-41页
     ·双顺反子表达载体的构建和重组子鉴定第41页
     ·目的基因表达产物的SDS-PAGE 和Western blot 分析第41页
     ·表达产物的可溶性对比分析第41页
     ·重组蛋白的纯化第41-44页
     ·重组蛋白的功能鉴定第44-45页
   ·讨论第45-46页
第四章 结论第46-47页
参考文献第47-54页
致谢第54-55页
作者简介第55页

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