摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-22页 |
·蛋白质二硫键异构酶 | 第12-17页 |
·蛋白质二硫键 | 第12页 |
·PDI 家族的成员 | 第12-13页 |
·PDI | 第13-16页 |
·DsbA | 第16页 |
·PDI 家族的其它成员 | 第16-17页 |
·PDI 家族的结构特征 | 第17页 |
·小麦低分子量麦谷蛋白研究进展 | 第17-21页 |
·低分子量麦谷蛋白的分类 | 第17-18页 |
·低分子量谷蛋白亚基分子的Cys 的分布及其结构 | 第18-19页 |
·低分子量麦谷蛋白的染色体定位 | 第19页 |
·谷蛋白聚合体的构成 | 第19-20页 |
·低分子量谷蛋白对加工品质的影响 | 第20页 |
·低分子量谷蛋白亚基体外功能鉴定研究 | 第20-21页 |
·本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
第二章 小麦“陕253”PDI 基因原核表达及蛋白纯化 | 第22-36页 |
·材料 | 第22-24页 |
·供试材料 | 第22页 |
·溶液的配制 | 第22-23页 |
·仪器 | 第23-24页 |
·实验方法 | 第24-30页 |
·引物设计 | 第24页 |
·小麦总RNA 的提取 | 第24-25页 |
·目的基因的扩增 | 第25页 |
·目的片段的回收纯化 | 第25-26页 |
·目的片段的克隆 | 第26页 |
·表达载体的构建 | 第26-28页 |
·重组质粒的诱导表达 | 第28-29页 |
·重组蛋白的Western blot 分析 | 第29-30页 |
·重组蛋白的纯化 | 第30页 |
·结果与分析 | 第30-34页 |
·PDI 基因的克隆 | 第30-31页 |
·目的片段的序列分析 | 第31-32页 |
·表达载体的构建和重组质粒的鉴定 | 第32-33页 |
·融合基因的诱导表达和纯化 | 第33-34页 |
·讨论 | 第34-36页 |
第三章 LMW/DsbA 双顺反子表达载体构建、原核表达及亚基品质效应鉴定 | 第36-46页 |
·材料 | 第36页 |
·供试材料 | 第36页 |
·溶液的配制 | 第36页 |
·仪器 | 第36页 |
·实验方法 | 第36-40页 |
·引物设计 | 第36页 |
·基因组DNA 的提取 | 第36-37页 |
·目的基因的扩增与目的片段的回收 | 第37-38页 |
·目的片段的克隆及其序列分析 | 第38-40页 |
·重组质粒的诱导表达 | 第40页 |
·重组蛋白的纯化 | 第40页 |
·重组蛋白的功能鉴定 | 第40页 |
·结果与分析 | 第40-45页 |
·融合基因LMW/DsbA 的克隆及其序列分析 | 第40-41页 |
·双顺反子表达载体的构建和重组子鉴定 | 第41页 |
·目的基因表达产物的SDS-PAGE 和Western blot 分析 | 第41页 |
·表达产物的可溶性对比分析 | 第41页 |
·重组蛋白的纯化 | 第41-44页 |
·重组蛋白的功能鉴定 | 第44-45页 |
·讨论 | 第45-46页 |
第四章 结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
作者简介 | 第55页 |