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miR-296在前列腺癌细胞系中的功能研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-11页
1. 第一章 前言第11-20页
   ·前列腺癌与雄激素第11-12页
   ·miRNA 与前列腺癌第12-17页
     ·miRNA 与肿瘤的发生第13-14页
     ·miRNA 与肿瘤的基因诊断第14-15页
     ·miRNA 与肿瘤的基因治疗第15-17页
   ·MPSS 技术在 miRNA 和 mRNA 水平的研究第17-19页
   ·本研究的设计思路和意义第19-20页
2. 第二章 实验材料与方法第20-32页
   ·实验材料第20-22页
     ·细胞系第20页
     ·主要试剂第20-21页
     ·主要实验仪器第21-22页
   ·常用实验操作第22-26页
     ·细胞复苏第22页
     ·细胞培养第22-23页
     ·总RNA 的提取第23页
     ·紫外吸收测定RNA第23-24页
     ·RNA 逆转录成cDNA第24页
     ·变性琼脂糖凝胶电泳检测miR-296 纯度第24-25页
     ·使用lipofectamine~(TM) 2000 转染miR-296第25-26页
   ·miRNA 芯片技术鉴定雄激素相关的 miRNA第26-28页
     ·miRNA 芯片分析第26页
     ·QRT-PCR 检测miR-296 在LNCaP 和CL-1 细胞中的表达差异第26-28页
   ·MiR-296 在前列腺癌细胞系中的生物学功能研究第28-29页
     ·miR-296 转染LNCaP 和CL-1 细胞观察细胞的生长第28页
     ·Annexin V/PI 染色第28页
     ·流式细胞仪检测细胞凋亡第28-29页
   ·MiR-296 target 基因研究第29-31页
     ·LNCaP 细胞培养、转染与总 RNA 抽提第29页
     ·MPSS 操作第29-30页
     ·MPSS 数据分析第30-31页
     ·RT-PCR 检测 BTBD14B mRNA 在前列腺细胞的表达第31页
   ·本章小结第31-32页
3. 第三章 结果第32-44页
   ·miR-296 在雄激素刺激下表达上调第32-33页
   ·抑制 miR-296 影响雄激素相关的前列腺癌细胞生长第33-35页
   ·抑制 miR-296 引起雄激素非依赖型的 CL-1 和 PC-3 细胞凋亡增加第35-38页
   ·转染 anti-miR-296 的 LNCaP 细胞的基因表达谱芯片(MPSS)第38-44页
4. 第四章 讨论第44-47页
   ·MiR-296 在前列腺癌细胞中的生物学功能第44页
   ·MiR-296 与雄激素的作用关系第44-45页
   ·BTBD14 可能是 miR-296 的目标作用基因第45-47页
5. 结论与展望第47-48页
   ·研究结论第47页
   ·研究展望第47-48页
6. 参考文献第48-52页
7. 致谢第52-53页
8. 攻读硕士学位期间已发表或录用的论文第53页

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