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苏云金芽胞杆菌群体信号应答因子nprR基因功能的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-13页
引言第13-27页
   ·苏云金芽胞杆菌杆菌概述第13-16页
     ·Bt 杀虫晶体蛋白简述第13-14页
     ·Bt 芽胞形成的生理生化机制简述第14-16页
   ·群体效应概述第16-18页
     ·革兰氏阴性菌的群体感应系统第16-17页
     ·革兰氏阳性菌的群体感应系统第17-18页
   ·枯草芽胞杆菌中的信号肽分子第18-25页
     ·Bs 信号肽分子种类及组成第18-19页
     ·Phr 蛋白的加工及转运过程第19-21页
     ·Phr 胞内作用过程第21-23页
     ·Bs 群体效应与Phr-Rap 蛋白第23-24页
     ·Bc 族及其他菌种中rap-phr 信号盒研究进展第24-25页
   ·本研究的立题依据和目的意义第25-27页
第二章 材料与方法第27-35页
   ·实验材料第27-29页
     ·菌株与质粒第27-28页
     ·培养基与抗生素第28页
     ·酶与生化试剂第28页
     ·常用溶液与缓冲液第28-29页
   ·仪器设备第29页
   ·实验方法第29-35页
     ·PCR 模板制备第29-30页
     ·PCR 扩增第30-31页
     ·酶切反应第31页
     ·E. coli 质粒DNA 提取,DNA 回收第31页
     ·琼脂糖凝胶电泳第31页
     ·目的DNA 的回收第31页
     ·DNA 片段的连接第31-32页
     ·E. coli 热击感受态细胞的制备第32页
     ·质粒热击转化E. coli第32页
     ·PCR 扩增片段的克隆与序列分析第32页
     ·E. coli 电击感受态细胞的制备第32页
     ·E. coli 电击转化方法第32-33页
     ·基因序列的测定及分析第33页
     ·氨基酸序列同源性分析第33页
     ·同源重组突变体的获得第33页
     ·Bt 菌株生长曲线的测定第33页
     ·SDS-PAGE 电泳第33-34页
     ·活芽胞记数第34页
     ·β-半乳糖苷酶活分析第34页
     ·对小菜蛾杀虫活性测定第34-35页
第三章 结果与分析第35-50页
   ·nprR 基因的克隆与序列分析第35-37页
   ·phr-like 基因的克隆与序列分析第37-38页
   ·nprR 基因缺失突变菌株的构建与鉴定第38-43页
     ·nprR 基因缺失片段的构建第38-41页
     ·nprR 基因缺失载体的构建与鉴定第41-42页
     ·nprR 基因突变体的筛选与验证第42-43页
   ·nprR 基因突变体的特点第43-46页
     ·nprR 基因缺失对菌体生长速度的影响第43-44页
     ·nprR 基因缺失对芽胞生成数量的影响第44-45页
     ·生物活性测定第45-46页
   ·相关基因启动子转录活性分析第46-50页
     ·HD-73 野生菌株中nprR 基因启动子转录活性分析第46-47页
     ·nprR 基因缺失对cry1Ac 基因表达的影响第47-48页
     ·人工合成信号肽在HD-73 及HD73(ΔnprR)对Cry 蛋白表达的影响第48-50页
第四章 讨论第50-53页
   ·NprR 蛋白结构域的分析第50页
   ·nprR 基因转录分析第50-51页
   ·nprR 基因缺失对cry1Ac 表达影响的分析第51页
   ·Bt 群体信号研究的意义第51-53页
第五章 结论第53-54页
参考文献第54-61页
致谢第61-63页
作者简历第63页

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