摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-13页 |
引言 | 第13-27页 |
·苏云金芽胞杆菌杆菌概述 | 第13-16页 |
·Bt 杀虫晶体蛋白简述 | 第13-14页 |
·Bt 芽胞形成的生理生化机制简述 | 第14-16页 |
·群体效应概述 | 第16-18页 |
·革兰氏阴性菌的群体感应系统 | 第16-17页 |
·革兰氏阳性菌的群体感应系统 | 第17-18页 |
·枯草芽胞杆菌中的信号肽分子 | 第18-25页 |
·Bs 信号肽分子种类及组成 | 第18-19页 |
·Phr 蛋白的加工及转运过程 | 第19-21页 |
·Phr 胞内作用过程 | 第21-23页 |
·Bs 群体效应与Phr-Rap 蛋白 | 第23-24页 |
·Bc 族及其他菌种中rap-phr 信号盒研究进展 | 第24-25页 |
·本研究的立题依据和目的意义 | 第25-27页 |
第二章 材料与方法 | 第27-35页 |
·实验材料 | 第27-29页 |
·菌株与质粒 | 第27-28页 |
·培养基与抗生素 | 第28页 |
·酶与生化试剂 | 第28页 |
·常用溶液与缓冲液 | 第28-29页 |
·仪器设备 | 第29页 |
·实验方法 | 第29-35页 |
·PCR 模板制备 | 第29-30页 |
·PCR 扩增 | 第30-31页 |
·酶切反应 | 第31页 |
·E. coli 质粒DNA 提取,DNA 回收 | 第31页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第31页 |
·目的DNA 的回收 | 第31页 |
·DNA 片段的连接 | 第31-32页 |
·E. coli 热击感受态细胞的制备 | 第32页 |
·质粒热击转化E. coli | 第32页 |
·PCR 扩增片段的克隆与序列分析 | 第32页 |
·E. coli 电击感受态细胞的制备 | 第32页 |
·E. coli 电击转化方法 | 第32-33页 |
·基因序列的测定及分析 | 第33页 |
·氨基酸序列同源性分析 | 第33页 |
·同源重组突变体的获得 | 第33页 |
·Bt 菌株生长曲线的测定 | 第33页 |
·SDS-PAGE 电泳 | 第33-34页 |
·活芽胞记数 | 第34页 |
·β-半乳糖苷酶活分析 | 第34页 |
·对小菜蛾杀虫活性测定 | 第34-35页 |
第三章 结果与分析 | 第35-50页 |
·nprR 基因的克隆与序列分析 | 第35-37页 |
·phr-like 基因的克隆与序列分析 | 第37-38页 |
·nprR 基因缺失突变菌株的构建与鉴定 | 第38-43页 |
·nprR 基因缺失片段的构建 | 第38-41页 |
·nprR 基因缺失载体的构建与鉴定 | 第41-42页 |
·nprR 基因突变体的筛选与验证 | 第42-43页 |
·nprR 基因突变体的特点 | 第43-46页 |
·nprR 基因缺失对菌体生长速度的影响 | 第43-44页 |
·nprR 基因缺失对芽胞生成数量的影响 | 第44-45页 |
·生物活性测定 | 第45-46页 |
·相关基因启动子转录活性分析 | 第46-50页 |
·HD-73 野生菌株中nprR 基因启动子转录活性分析 | 第46-47页 |
·nprR 基因缺失对cry1Ac 基因表达的影响 | 第47-48页 |
·人工合成信号肽在HD-73 及HD73(ΔnprR)对Cry 蛋白表达的影响 | 第48-50页 |
第四章 讨论 | 第50-53页 |
·NprR 蛋白结构域的分析 | 第50页 |
·nprR 基因转录分析 | 第50-51页 |
·nprR 基因缺失对cry1Ac 表达影响的分析 | 第51页 |
·Bt 群体信号研究的意义 | 第51-53页 |
第五章 结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-61页 |
致谢 | 第61-63页 |
作者简历 | 第63页 |