摘要 | 第1-3页 |
Abstract | 第3-5页 |
中文文摘 | 第5-7页 |
目录 | 第7-10页 |
绪论 | 第10-22页 |
一. 研究背景 | 第10页 |
二 糖代谢及蔗糖磷酸合成酶概述 | 第10-13页 |
·蔗糖的易位 | 第10-11页 |
·光合作用中CO2的同化和糖磷酸合成酶活性的关系 | 第11页 |
·葡萄糖-6-磷酸和无机磷、PH值调节菠菜叶的SPS活性 | 第11-12页 |
·在香蕉成熟阶段SPS在蔗糖生物合成中的作用以及和呼吸骤变的关系 | 第12-13页 |
·玉米叶片中SPS在细胞和组织中的表达水平 | 第13页 |
三 蔗糖磷酸合成酶基因启动子的研究进展 | 第13-14页 |
·水稻SPS1启动子的研究进展 | 第13-14页 |
·猕猴桃SPS-A2基因启动子的研究进展 | 第14页 |
·香蕉SPS基因启动子的研究进展 | 第14页 |
四 报告基因 | 第14-20页 |
·GFP基因[67] | 第15-18页 |
·GUS基因 | 第18-20页 |
·GUS的生理生化研究 | 第18-20页 |
·GUS的分子生物学研究 | 第20页 |
五、本研究的目的和意义 | 第20-22页 |
第一章 甘蔗SPSⅢ基因5'侧翼序列缺失表达载体遗传转化烟草及分析 | 第22-44页 |
第一节 前言 | 第22页 |
第二节 材料与试剂 | 第22-24页 |
·植物材料 | 第22页 |
·菌株 | 第22-23页 |
·主要试剂 | 第23-24页 |
·烟草培养基 | 第24页 |
第三节 实验方法 | 第24-28页 |
·农杆菌介导的叶盘转化 | 第24-25页 |
·烟草外植体的准备 | 第24页 |
·菌液准备 | 第24-25页 |
·侵染与共培养 | 第25页 |
·筛选培养 | 第25页 |
·生根培养 | 第25页 |
·土壤栽培 | 第25页 |
·烟草抗性植株的检测 | 第25-27页 |
·抗性植株总DNA的提取 | 第25-26页 |
·PCR检测 | 第26-27页 |
·T1代抗性苗的筛选 | 第27页 |
·GUS基因在转基因烟草中的表达分析 | 第27-28页 |
·GUS染色液的配制 | 第27页 |
·组织化学分析 | 第27-28页 |
第四节 结果与分析 | 第28-41页 |
·烟草的筛选培养和生根培养 | 第28页 |
·烟草的土壤栽培 | 第28-29页 |
·烟草抗性苗的PCR鉴定 | 第29-31页 |
·转基因烟草GUS检测分析 | 第31-40页 |
·D6-SP1的转基因烟草组织化学分析 | 第31-33页 |
·D6-SP2的转基因烟草组织化学分析 | 第33-35页 |
·D6-SP3的转基因烟草组织化学分析 | 第35-36页 |
·D6-SP4的转基因烟草组织化学分析 | 第36-38页 |
·D6-SP5的转基因烟草组织化学分析 | 第38-39页 |
·D6-SP-POS的转基因烟草组织化学分析 | 第39-40页 |
·小结 | 第40-41页 |
第五节 讨论 | 第41-44页 |
·根癌农杆菌介导的植物基因转化 | 第41-42页 |
·TI质粒的结构 | 第41页 |
·TI质粒载体系统 | 第41页 |
·TI质粒介导的遗传转化方法 | 第41-42页 |
·蔗糖磷酸合成酶基因启动子的研究 | 第42-44页 |
第二章 甘蔗SPSⅢ基因启动子的缺失表达载体的构建 | 第44-58页 |
第一节 前言 | 第44页 |
第二节 材料与试剂 | 第44页 |
·植物材料 | 第44页 |
·菌株及质粒 | 第44页 |
·主要试剂 | 第44页 |
第三节 方法 | 第44-52页 |
·甘蔗SPSⅢ启动子的缺失表达载体 | 第44-51页 |
·甘蔗SPSⅢ启动子缺失片段的扩增 | 第44-47页 |
·植物表达载体的构建 | 第47-49页 |
·连接产物的转化 | 第49页 |
·重组质粒的提取与鉴定 | 第49-51页 |
·转化农杆菌GV3101 | 第51-52页 |
·农杆菌感受态的制备 | 第51页 |
·重组质粒转化农杆菌 | 第51-52页 |
·农杆菌的鉴定 | 第52页 |
第四节 结果与分析 | 第52-56页 |
·甘蔗SPSⅢ启动子缺失片段的扩增 | 第52-53页 |
·SPSⅢ启动子缺失片段植物表达载体的构建 | 第53-55页 |
·农杆菌转化子的鉴定 | 第55-56页 |
第五节 讨论 | 第56-58页 |
第三章 结论 | 第58-60页 |
附录1 植物激素的配制 | 第60-61页 |
附录2 MS培养基的配置 | 第61-62页 |
附录3 质粒的提取 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-70页 |
攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第70-72页 |
致谢 | 第72页 |