| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 引言 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-26页 |
| 1. 食用菌菌种特点 | 第13页 |
| 2. 菌种纯度及其检测方法研究 | 第13-17页 |
| ·菌种纯度及其在生产中的重要性 | 第13-14页 |
| ·菌种细菌检测 | 第14页 |
| ·菌种内生细菌检测 | 第14页 |
| ·菌种霉菌孢子的检测 | 第14-15页 |
| ·菌种病毒的检测 | 第15-17页 |
| 3. 分子标记及其在品种鉴别研究中的应用 | 第17-22页 |
| ·基因间隔序列( ITS) | 第18-19页 |
| ·基因间隔序列( ITS)的概念和结构特征 | 第18页 |
| ·ITS 研究的原理与应用 | 第18-19页 |
| ·ITS 方法在研究中存在的问题和缺陷 | 第19页 |
| ·RFLP (restriction fragment length polymorphism) 标记及其应用 | 第19-20页 |
| ·ITS-RFLP 在食用菌种质资源研究中的应用 | 第20-21页 |
| ·相关序列扩增多态性SRAP (Sequence2Related Amplified Polymorp hism) | 第21-22页 |
| ·SRAP 分子标记技术的特点 | 第21页 |
| ·SRAP 技术的应用 | 第21-22页 |
| 4. 菌种活力与生理性状关系的研究 | 第22-26页 |
| ·胞外酶活性的研究与应用 | 第23-25页 |
| ·菌种耐高温能力的研究 | 第25-26页 |
| 第二章 金针菇菌种纯度检测技术研究 | 第26-47页 |
| 第一节 细菌的检测 | 第26-31页 |
| 1 材料与方法 | 第26-28页 |
| ·供试菌株 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26页 |
| ·细菌16S rDNA 扩增引物、体系及程序 | 第26-27页 |
| ·污染菌种的制作 | 第27页 |
| ·细菌检测方法 | 第27-28页 |
| 2 结果与分析 | 第28-30页 |
| ·平板划线快速检测结果 | 第28-29页 |
| ·平板涂布快速检测结果 | 第29页 |
| ·液体培养结果 | 第29-30页 |
| ·煮沸法快速提取DNA PCR 扩增结果 | 第30页 |
| 3 讨论 | 第30-31页 |
| 第二节 霉菌孢子的检测 | 第31-33页 |
| 1 材料与方法 | 第31-32页 |
| ·供试菌株 | 第31页 |
| ·培养基 | 第31页 |
| ·污染菌种的制作 | 第31-32页 |
| ·木霉检测方法 | 第32页 |
| 2 结果与分析 | 第32-33页 |
| ·木霉孢子数目及孢子和菌丝显微形态结果 | 第32页 |
| ·木霉孢子检测结果 | 第32-33页 |
| 3 讨论 | 第33页 |
| 第三节 内生细菌的检测 | 第33-43页 |
| 一、原生质体爆破检测内生细菌 | 第34-36页 |
| 1 材料与方法 | 第34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-36页 |
| 二、抗生素法检测内生细菌 | 第36-43页 |
| 1 材料与方法 | 第36页 |
| 2 实验方法 | 第36-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-43页 |
| 三、讨论 | 第43页 |
| 第四节 病毒的检测 | 第43-47页 |
| 1 材料与方法 | 第43-45页 |
| ·供试菌株 | 第43页 |
| ·培养基 | 第43页 |
| ·实验方法 | 第43-45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-46页 |
| ·病毒的dsRNA 凝胶电泳分析 | 第45页 |
| ·DNase 酶切和RNase 酶切 | 第45-46页 |
| 3 讨论 | 第46-47页 |
| 第三章 金针菇菌种品种鉴别技术研究 | 第47-55页 |
| 第一节 种间鉴别 | 第47-50页 |
| 1 材料与方法 | 第47-48页 |
| ·供试菌株 | 第47页 |
| ·培养基与菌丝培养 | 第47页 |
| ·DNA 提取 | 第47页 |
| ·ITS-PCR | 第47-48页 |
| ·ITS-RFLP | 第48页 |
| 2 结果与分析 | 第48-50页 |
| ·不同菇ITS 长度结果统计 | 第48页 |
| ·金针菇F0025、F0030、F0305 对ITS-RFLP 技术的验证结果 | 第48-50页 |
| 第二节 金针菇菌种的种内鉴别 | 第50-55页 |
| 1 材料与方法 | 第50-52页 |
| ·供试菌株 | 第50页 |
| ·培养基与菌丝培养 | 第50页 |
| ·实验方法 | 第50页 |
| ·SRAP 引物及碱基序列 | 第50页 |
| ·SRAP-PCR 扩增反应体系和程序 | 第50-51页 |
| ·SRAP 技术鉴定菌种种性 | 第51-52页 |
| 2 结果与分析 | 第52-53页 |
| ·SRAP 引物筛选结果 | 第52页 |
| ·SRAP-PCR 多态性引物的验证结果 | 第52-53页 |
| 3 讨论 | 第53-55页 |
| 第四章 金针菇菌种活力检测技术研究 | 第55-72页 |
| 第一节 胞外酶酶活性的测量 | 第55-64页 |
| 1 材料与方法 | 第55-58页 |
| ·供试菌株 | 第55页 |
| ·培养基 | 第55页 |
| ·试剂 | 第55-56页 |
| ·实验方法 | 第56-58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-64页 |
| ·不同菌龄菌种外观形态 | 第58-59页 |
| ·不同菌龄下的CMC 酶活性变化 | 第59-60页 |
| ·不同菌龄下的木聚糖酶活性变化 | 第60-61页 |
| ·不同菌龄下的淀粉酶活性变化 | 第61页 |
| ·不同菌龄下的漆酶活性变化 | 第61-62页 |
| ·不同菌龄下的多酚氧化酶活性变化 | 第62-63页 |
| ·不同菌龄下的TTC-脱氢酶活性变化 | 第63-64页 |
| 3 讨论 | 第64页 |
| 第二节 不同菌龄菌种耐高温能力的检测 | 第64-69页 |
| 1 材料与方法 | 第64-65页 |
| ·供试菌株 | 第64页 |
| ·培养基 | 第64页 |
| ·耐高温能力测定实验的处理温度和时间确定 | 第64-65页 |
| ·耐高温实验 | 第65页 |
| 2 结果与分析 | 第65-68页 |
| ·80 天菌龄的F0030 耐高温能力测定结果 | 第65页 |
| ·0 天菌龄菌种耐高温能力的处理温度结果 | 第65-66页 |
| ·耐高温实验结果 | 第66-68页 |
| 3 讨论 | 第68-69页 |
| 第三节 金针菇菌种质量检测技术操作指南 | 第69-72页 |
| 参考文献 | 第72-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
