摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
第一章 前言 | 第9-26页 |
1 塔里木马鹿概况 | 第9-11页 |
2 塔里木马鹿研究现状 | 第11-12页 |
3 非损伤性取样方法的选择 | 第12-13页 |
·毛发的非损伤性取样 | 第12页 |
·粪便的非损伤性取样 | 第12-13页 |
·其他样品的非损伤性取样 | 第13页 |
4 粪便样本的优点 | 第13页 |
5 粪便DNA 提取的可行性 | 第13-14页 |
6 粪便的DNA 分子标记 | 第14-15页 |
·线粒体DNA | 第14页 |
·微卫星 | 第14页 |
·多位点小卫星 | 第14-15页 |
·性别标记序列 | 第15页 |
7 粪便DNA 在濒危野生动物保护中的应用 | 第15-17页 |
·物种鉴定 | 第15页 |
·个体识别和数量调查 | 第15-16页 |
·性别鉴定 | 第16页 |
·亲缘关系的鉴定 | 第16页 |
·父权的认定 | 第16页 |
·食性及寄生虫分析 | 第16-17页 |
·构建指纹图谱 | 第17页 |
·与GIS 技术的结合 | 第17页 |
·与免疫分析方法的结合 | 第17页 |
8 粪便DNA 提取方法 | 第17-19页 |
·试剂盒提取 | 第18页 |
·硫氰酸胍(GuSCN)—二氧化硅(SiO_2)法 | 第18页 |
·十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法 | 第18页 |
·酚/氯仿法 | 第18-19页 |
9 性别决定基因 | 第19-25页 |
·SRY 基因的发现与证实 | 第19页 |
·SRY 基因的定位历史 | 第19-20页 |
·SRY 基因是TDF 的证实 | 第20页 |
·SRY 基因的结构与功能 | 第20-21页 |
·性别鉴定的方法及现状 | 第21-25页 |
10 本研究的目的意义 | 第25-26页 |
第二章 塔里木马鹿粪便DNA 提取流程的建立 | 第26-38页 |
1 研究材料 | 第26页 |
·采集时间和地点 | 第26页 |
·采集方法 | 第26页 |
2 试验主要试剂与配置 | 第26-27页 |
3 主要仪器和设备 | 第27页 |
4 提取方法 | 第27-31页 |
·硫氰酸呱(GuSCN)裂解法 | 第27-28页 |
·CTAB 裂解法 | 第28页 |
·预处理—酚/氯仿法 | 第28-29页 |
·粪便DNA 提取试剂盒 | 第29页 |
·改进后的方法——多管预处理 CTAB+SiO_2 吸附法 | 第29-30页 |
·陈旧皮张的DNA 提取 | 第30-31页 |
5 粪便DNA 琼脂糖电泳结果与分析 | 第31-35页 |
·硫氰酸呱(GuSCN)裂解法的检测结果 | 第31-32页 |
·CTAB 裂解法检测结果 | 第32页 |
·预处理-酚/氯仿法检测结果 | 第32-33页 |
·试剂盒法检测结果 | 第33-34页 |
·多管预处理 CTAB+SiO_2吸附法 | 第34-35页 |
6 讨论 | 第35-36页 |
·粪便DNA 提取的主要困难 | 第35页 |
·常用粪便提取方法的优点 | 第35-36页 |
7 结论 | 第36-38页 |
第三章 塔里木马鹿粪便提取的相关因素 | 第38-46页 |
1 保存方法对粪便DNA 提取的影响 | 第38-43页 |
·研究材料 | 第39-40页 |
·研究方法 | 第40-41页 |
·研究结果 | 第41-42页 |
·最适条件下粪便DNA 的提取结果 | 第42-43页 |
2 取样方法对粪便DNA 提取的影响 | 第43-44页 |
3 预处理对粪便DNA 提取的影响 | 第44页 |
4 讨论 | 第44-45页 |
5 结论 | 第45-46页 |
第四章 塔里木马鹿的性别鉴定研究 | 第46-54页 |
1 研究材料 | 第46页 |
2 提取方法 | 第46-47页 |
·血液提取方法 | 第46-47页 |
·粪便DNA 的提取 | 第47页 |
3 塔里木马鹿粪便的PCR | 第47-49页 |
·PCR 引物 | 第47页 |
·PCR 扩增 | 第47-48页 |
·PCR 反应条件 | 第48页 |
·PCR 产物检测 | 第48-49页 |
·PCR 结果 | 第49页 |
4 结果 | 第49-51页 |
5 讨论 | 第51-54页 |
·PCR 增强剂的选择 | 第52-53页 |
·塔里木马鹿种群的性比 | 第53-54页 |
第五章 总结与展望 | 第54-56页 |
·总结 | 第54-55页 |
·展望 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-63页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第63-64页 |
致谢 | 第64页 |