摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
目录 | 第7-9页 |
英文缩写词表 | 第9-11页 |
引言 | 第11-12页 |
1 文献综述 | 第12-20页 |
·棉花组织培养与植株再生研究进展 | 第12-17页 |
·棉花的体细胞培养及植株再生 | 第12-15页 |
·茎尖培养 | 第15-16页 |
·胚珠和胚培养 | 第16页 |
·花药培养 | 第16页 |
·原生质体培养 | 第16-17页 |
·棉花转基因技术研究进展 | 第17-19页 |
·棉花遗传转化方法 | 第17-18页 |
·外源基因 | 第18页 |
·棉花的遗传转化体系 | 第18-19页 |
·本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
2 试验材料 | 第20-24页 |
·植物材料 | 第20页 |
·菌株与质粒 | 第20页 |
·常用酶和生化试剂 | 第20-21页 |
·培养基 | 第21-23页 |
·主要仪器设备 | 第23-24页 |
3 实验方法 | 第24-35页 |
·海岛棉的体细胞胚胎发生及植株再生 | 第24-25页 |
·外植体的选择及其消毒处理 | 第24页 |
·胚珠愈伤组织的诱导 | 第24页 |
·愈伤组织的分化 | 第24页 |
·胚性愈伤组织的细胞状态调控 | 第24-25页 |
·体细胞胚胎的诱导 | 第25页 |
·子叶胚的萌发及植株再生 | 第25页 |
·目的基因克隆方法 | 第25-31页 |
·模板的制备 | 第26-27页 |
·扩增Rbcs2、Rbcs3b、AtGAI基因 | 第27-28页 |
·PCR产物的 收 | 第28页 |
·扩增产物的克隆 | 第28-31页 |
·序列测定、分析及比对 | 第31页 |
·植物表达载体的构建 | 第31-34页 |
·植物表达载体pBPR2gai的构建 | 第31-32页 |
·植物表达载体pBPR4gai的构建 | 第32-34页 |
·农杆菌介导的海岛棉胚性愈伤组织遗传转化方法 | 第34-35页 |
·农杆菌侵染液的制备 | 第34页 |
·转化方法 | 第34-35页 |
4 结果与分析 | 第35-47页 |
·海岛棉体细胞胚胎的诱导及植株再生 | 第35-43页 |
·愈伤组织的诱导 | 第35-36页 |
·愈伤组织的分化 | 第36-38页 |
·胚性愈伤组织的细胞状态调控 | 第38-39页 |
·体细胞胚胎的诱导 | 第39-41页 |
·子叶胚的萌发及植株再生 | 第41-43页 |
·克隆目的基因序列分析 | 第43-44页 |
·植物表达载体构建结果分析 | 第44-45页 |
·植物表达载体pBPR2gai和pBPR4gai的获得 | 第44-45页 |
·植物表达载体pBPR2gai和pBPR4gai转化农杆菌GV3101 | 第45页 |
·农杆菌介导海岛棉胚性愈伤转化结果分析 | 第45-47页 |
5 讨论 | 第47-48页 |
结论与展望 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-53页 |
附录1:主要技术路线 | 第53-54页 |
附录2:主要培养基、溶液配制 | 第54-57页 |
附录3:载体构建流程图 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
作者简介 | 第59-60页 |
附表 | 第60页 |