摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-12页 |
缩略语表 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-35页 |
1 油菜雄性不育与杂种优势利用 | 第13-16页 |
·细胞质雄性不育(CMS) | 第13-14页 |
·细胞核雄性不育(GMS) | 第14页 |
·基因工程雄性不育 | 第14-16页 |
2 植物花药发育的研究 | 第16-26页 |
·植物花药发育的过程和时期的划分 | 第16-19页 |
·花药表皮的发育 | 第19-20页 |
·绒毡层的发育及功能 | 第20-24页 |
·绒毡层的发育 | 第20-21页 |
·绒毡层的功能 | 第21-22页 |
·影响绒毡层发育和功能的相关基因 | 第22-24页 |
·花粉壁的发育 | 第24-26页 |
·花粉壁的形成 | 第24-25页 |
·与花粉外壁形成相关的基因 | 第25-26页 |
3 植物P450基因的研究进展 | 第26-29页 |
·植物P450基因的结构特点 | 第26-27页 |
·植物P450基因的功能研究 | 第27-28页 |
·参与生物合成途径的植物P450 | 第27-28页 |
·植物P450的解毒功能 | 第28页 |
·植物细胞色素P450研究展望 | 第28-29页 |
4 转基因技术在油菜遗传改良上的应用 | 第29-33页 |
5 本研究的目的和意义 | 第33-35页 |
第二章 甘蓝型油菜隐性核不育S45AB的分子机理研究 | 第35-73页 |
1 引言 | 第35-36页 |
2 材料与方法 | 第36-47页 |
·试验材料 | 第36-37页 |
·隐性核不育材料S45AB表型观察 | 第37页 |
·扫描电镜 | 第37页 |
·透射电镜 | 第37页 |
·TUNEL分析 | 第37页 |
·载体的构建 | 第37-40页 |
·转化载体的构建 | 第37-40页 |
·亚细胞定位载体 | 第40页 |
·农杆菌介导的遗传转化 | 第40-41页 |
·转基因植株的检测 | 第41-43页 |
·转基因植株的PCR检测 | 第41页 |
·总DNA的提取与Southern杂交 | 第41-43页 |
·表型与外源基因的共分离检测 | 第43页 |
·转基因植株育性的分子标记检测 | 第43页 |
·BnCYP704B1序列及其进化分析 | 第43-44页 |
·比较测序 | 第44页 |
·RNA的抽提与RT-PCR | 第44-45页 |
·原位杂交 | 第45页 |
·GUS与GFP的观察 | 第45-46页 |
·总花蕾的脂质分析 | 第46-47页 |
·花药表皮的脂质分析 | 第47页 |
3 结果与分析 | 第47-66页 |
·S45A绒毡层发育和花粉外壁的形成受阻 | 第47-51页 |
·扫描电镜 | 第47-48页 |
·透射电镜 | 第48-51页 |
·S45A绒毡层PCD推迟 | 第51-52页 |
·载体的构建 | 第52-53页 |
·遗传转化材料的获得与鉴定 | 第53-57页 |
·BnCYP704B1序列及其进化分析 | 第57-59页 |
·比较测序 | 第59-60页 |
·BnCYP704B1基因的表达模式 | 第60-62页 |
·BnCYP704B1的亚细胞定位 | 第62-63页 |
·总花蕾的脂质分析 | 第63-64页 |
·花药表皮脂质的分析 | 第64-66页 |
·小结 | 第66页 |
4 讨论 | 第66-73页 |
·甘蓝型油菜农杆菌介导的遗传转化 | 第66-68页 |
·BnCYP704B1参与了花粉外壁的形成、孢粉素的合成和花药表皮的发育 | 第68-69页 |
·BnCYP704B1影响了绒毡层的发育 | 第69-70页 |
·BnCYP704B1在孢粉素和花药角质合成中的作用模式 | 第70-72页 |
·下一步工作 | 第72-73页 |
第三章 利用BnCYP704B1基因创建隐性核不育保持系的初步研究 | 第73-85页 |
1 引言 | 第73-74页 |
2 材料与方法 | 第74-77页 |
·转化植物材料 | 第74页 |
·化学诱导表达系统 | 第74页 |
·载体构建 | 第74-76页 |
·农杆菌介导的遗传转化 | 第76页 |
·化学诱导剂的配制 | 第76-77页 |
3 结果与分析 | 第77-81页 |
·载体的构建 | 第77-78页 |
·阳性苗的检测 | 第78-79页 |
·表型分析 | 第79-81页 |
·纸床观察 | 第79-81页 |
·穴盘观察 | 第81页 |
4 讨论 | 第81-85页 |
·化学诱导表达系统 | 第81-83页 |
·下一步工作 | 第83-85页 |
参考文献 | 第85-100页 |
附录1:甘蓝型油菜遗传转化所用的培养基 | 第100页 |
附录2:GUS染色液的配制 | 第100-101页 |
附录3:作者简介和在读期间发表论文 | 第101-102页 |
作者简介 | 第101页 |
在读期间发表论文 | 第101-102页 |
致谢 | 第102页 |