摘要 | 第6-8页 |
abstract | 第8-9页 |
英文缩略表 | 第14-15页 |
第一章 引言 | 第15-31页 |
1.1 植物挥发物简介 | 第15-16页 |
1.2 虫害诱导的植物挥发物 | 第16-18页 |
1.2.1 虫害诱导植物挥发物的释放特点 | 第16页 |
1.2.2 虫害诱导植物挥发物的生态学功能 | 第16-17页 |
1.2.3 虫害诱导植物挥发物释放的影响因子 | 第17页 |
1.2.4 虫害诱导的植物挥发物合成途径 | 第17-18页 |
1.3 植物细胞色素P450 | 第18-25页 |
1.3.1 植物细胞色素P450 的命名及分类 | 第19-20页 |
1.3.2 P450 蛋白结构 | 第20-22页 |
1.3.3 细胞色素P450 功能 | 第22-25页 |
1.4 萜烯合酶的体外酶活测定 | 第25-26页 |
1.5 病毒诱导的基因沉默 | 第26页 |
1.6 利用转基因技术调控植物挥发物合成 | 第26-27页 |
1.7 棉花中虫害诱导的植物挥发物研究进展 | 第27-29页 |
1.7.1 虫害诱导的棉花挥发物种类 | 第27-28页 |
1.7.2 参与虫害诱导的棉花萜烯类挥发物合成的基因 | 第28-29页 |
1.8 本文研究目的 | 第29-31页 |
第二章 室内测定萜烯同系物对寄生蜂的行为影响 | 第31-37页 |
2.1 实验方法 | 第31-33页 |
2.1.1 供试棉花 | 第31页 |
2.1.2 供试虫源 | 第31-32页 |
2.1.3 棉花处理 | 第32页 |
2.1.4 虫害诱导的棉花挥发物收集 | 第32页 |
2.1.5 GC-MS分析鉴定收集到的化合物 | 第32页 |
2.1.6 DMNT与 TMTT对寄生蜂电生理反应测定 | 第32-33页 |
2.1.7 寄生蜂对DMNT与 TMTT的行为选择 | 第33页 |
2.1.8 数据处理 | 第33页 |
2.2 实验结果 | 第33-36页 |
2.2.1 虫害诱导的棉花挥发物中萜烯同系物的检测 | 第33-34页 |
2.2.2 植食性害虫寄生蜂对萜烯同系物的电生理反应 | 第34-35页 |
2.2.3 行为选择试验 | 第35-36页 |
2.3 讨论 | 第36-37页 |
第三章 陆地棉CYP基因家族分析 | 第37-56页 |
3.1 实验材料与方法 | 第37-38页 |
3.1.1 基因组数据库来源 | 第37-38页 |
3.1.2 陆地棉P450 序列筛选 | 第38页 |
3.1.3 陆地棉P450 系统进化分析 | 第38页 |
3.1.4 陆地棉CYP82 家族分析 | 第38页 |
3.2 结果与分析 | 第38-54页 |
3.2.1 陆地棉中P450 的筛选与命名 | 第38-51页 |
3.2.2 陆地棉P450 系统进化分析 | 第51-52页 |
3.2.3 陆地棉CYP82 家族功能分析 | 第52-54页 |
3.3 讨论 | 第54-56页 |
第四章 参与萜烯同系物合成的CYP基因功能鉴定 | 第56-74页 |
4.1 实验材料与方法 | 第56-64页 |
4.1.1 试剂和仪器 | 第56-58页 |
4.1.2 参与萜烯同系物的候选CYP基因的筛选 | 第58页 |
4.1.3 候选CYP基因体外重组表达载体的构建 | 第58-60页 |
4.1.4 候选CYP基因重组表达载体的诱导表达 | 第60-61页 |
4.1.5 候选CYP体外酶活测定 | 第61页 |
4.1.6 荧光定量检测候选基因的表达量 | 第61-62页 |
4.1.7 用于过表达的植物表达载体构建 | 第62页 |
4.1.8 过表达目的基因烟草的获得 | 第62页 |
4.1.9 烟草中目的基因表达量分析 | 第62页 |
4.1.10 过表达目的基因烟草挥发物收集分析 | 第62-63页 |
4.1.11 用于基因沉默的载体构建 | 第63页 |
4.1.12 用于基因沉默的重组载体的转化 | 第63页 |
4.1.13 沉默后棉花萜烯同系物释放量检测 | 第63页 |
4.1.14 被沉默基因的表达量检测 | 第63-64页 |
4.2 实验结果 | 第64-72页 |
4.2.1 候选基因筛选 | 第64-65页 |
4.2.2 候选基因体外酶活测定结果 | 第65-66页 |
4.2.3 CPR对候选基因酶活的影响 | 第66-67页 |
4.2.4 参与萜烯同系物合成的CYP基因的命名 | 第67-68页 |
4.2.5 目的基因组织表达谱分析 | 第68-69页 |
4.2.6 转基因烟草中目的基因的表达量 | 第69-70页 |
4.2.7 目的基因高表达的烟草中挥发物的收集分析 | 第70页 |
4.2.8 qPCR检测目的基因沉默情况 | 第70-71页 |
4.2.9 目的基因沉默后棉花中萜烯同系物的释放 | 第71-72页 |
4.3 讨论 | 第72-74页 |
第五章 参与萜烯同系物合成的CYP与 TPS共表达研究 | 第74-88页 |
5.1 实验材料与方法 | 第74-81页 |
5.1.1 主要试剂和仪器 | 第74-76页 |
5.1.2 GhTPS与 GhCYP基因组织表达谱 | 第76页 |
5.1.3 用于体外酶活测定的共表达载体构建 | 第76-78页 |
5.1.4 用于体外酶活测定的重组穿梭载体的诱导表达 | 第78-79页 |
5.1.5 酶活测定 | 第79页 |
5.1.6 用于转基因的植物表达载体构建 | 第79-81页 |
5.1.7 转基因烟草的获得 | 第81页 |
5.1.8 转基因烟草中目的基因表达量分析 | 第81页 |
5.1.9 转基因烟草挥发物的收集与分析 | 第81页 |
5.2 实验结果 | 第81-86页 |
5.2.1 GhTPS与 GhCYP基因组织表达谱分析 | 第81-84页 |
5.2.2 GhTPS与 GhCYP体外共表达时酶活测定 | 第84-85页 |
5.2.3 转基因烟草中目的基因表达量分析 | 第85-86页 |
5.2.4 目的基因高表达的烟草植株挥发物分析 | 第86页 |
5.3 讨论 | 第86-88页 |
第六章 全文总结 | 第88-89页 |
6.1 全文主要结论 | 第88页 |
6.2 下一步研究计划 | 第88页 |
6.3 本文创新点 | 第88页 |
6.4 本文不足之处 | 第88-89页 |
参考文献 | 第89-103页 |
致谢 | 第103-105页 |
作者简历 | 第105页 |