| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 前言 | 第11-30页 |
| 1.1 脂肪肝 | 第11-18页 |
| 1.1.1 脂肪肝的流行病学 | 第11-13页 |
| 1.1.2 脂肪肝的成因 | 第13-17页 |
| 1.1.3 脂肪肝的危害 | 第17页 |
| 1.1.4 脂肪肝的诊断和治疗 | 第17-18页 |
| 1.2 Gab2蛋白 | 第18-23页 |
| 1.2.1 衔接蛋白、支架或停泊蛋白 | 第18-19页 |
| 1.2.2 Gab家族蛋白的组成与结构 | 第19-20页 |
| 1.2.3 Gab2蛋白在信号转导中的平台作用 | 第20-22页 |
| 1.2.4 Gab2蛋白与脂肪肝 | 第22-23页 |
| 1.3 基于质谱的蛋白质组学 | 第23-27页 |
| 1.3.1 蛋白质组学 | 第23-24页 |
| 1.3.2 定性蛋白质组学 | 第24-26页 |
| 1.3.3 定量蛋白质组学 | 第26-27页 |
| 1.4 生物信息学分析 | 第27-28页 |
| 1.5 本课题的研究内容和意义 | 第28-30页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第30-52页 |
| 2.1 实验材料 | 第30-38页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第30页 |
| 2.1.2 菌株及质粒 | 第30页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第30-32页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第32-33页 |
| 2.1.5 试剂盒 | 第33-34页 |
| 2.1.6 主要溶液及配制 | 第34-38页 |
| 2.2 实验方法 | 第38-52页 |
| 2.2.1 大肠杆菌超级感受态细胞的制备 | 第38页 |
| 2.2.2 Flag-Gab2重组质粒构建 | 第38-42页 |
| 2.2.3 质粒的大量制备 | 第42-43页 |
| 2.2.4 细胞培养 | 第43-44页 |
| 2.2.5 质粒的瞬时转染 | 第44页 |
| 2.2.6 免疫印迹试验(Western Blot) | 第44-46页 |
| 2.2.7 筛选稳转细胞系 | 第46-47页 |
| 2.2.8 免疫沉淀 | 第47页 |
| 2.2.9 摸索油酸和酒精处理的最佳条件 | 第47-48页 |
| 2.2.10 稳定同位素标记(SILAC) | 第48页 |
| 2.2.11 银染 | 第48-49页 |
| 2.2.12 溶液内酶解(eFASP) | 第49页 |
| 2.2.13 除盐(SPE柱) | 第49-50页 |
| 2.2.14 质谱分析及数据库检索 | 第50-52页 |
| 第三章 结果分析与讨论 | 第52-70页 |
| 3.1 重组质粒pCMV-flag-Gab2的构建 | 第52-54页 |
| 3.2 筛选pCMV-flag-Gab2稳转细胞系 | 第54-56页 |
| 3.3 细胞免疫沉淀和银染检测纯化效率 | 第56-58页 |
| 3.4 质谱结合生物信息学定性分析Gab2相互作用蛋白 | 第58-63页 |
| 3.5 SILAC第四代重型同位素培养细胞标记效率 | 第63-64页 |
| 3.6 油酸和酒精诱导Gab2蛋白表达增加 | 第64-66页 |
| 3.7 质谱分析Gab2相互作用蛋白的动态变化 | 第66-70页 |
| 第四章 小结与展望 | 第70-72页 |
| 附录一 定性质谱新发现的Gab2结合蛋白(三次平均值) | 第72-82页 |
| 附录二 攻读硕士期间发表或投稿的文章 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
