| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 前言 | 第12-23页 |
| 1.1 结直肠癌 | 第12-13页 |
| 1.2 RNA螺旋酶及DHX32 | 第13-15页 |
| 1.3 原核表达及蛋白纯化 | 第15-18页 |
| 1.3.1 原核表达系统 | 第15-18页 |
| 1.3.2 蛋白纯化 | 第18页 |
| 1.4 单克隆抗体研究现状及应用 | 第18-20页 |
| 1.4.1 单克隆抗体制备原理及方法 | 第18-20页 |
| 1.4.2 单克隆抗体在临床上的应用 | 第20页 |
| 1.5 蛋白质结构预测 | 第20-22页 |
| 1.6 研究的内容和意义 | 第22-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-43页 |
| 2.1 主要仪器 | 第23-24页 |
| 2.2 主要耗材 | 第24页 |
| 2.3 主要试剂及实验动物 | 第24-25页 |
| 2.4 临床标本 | 第25页 |
| 2.5 常用溶液配制 | 第25-30页 |
| 2.6 主要实验方法 | 第30-43页 |
| 第三章 实验结果 | 第43-67页 |
| 3.1 DHX32重组蛋白原核表达及活性鉴定 | 第43-48页 |
| 3.1.1 获取DHX32基因序列 | 第43页 |
| 3.1.2 DHX32重组表达质粒的构建 | 第43-46页 |
| 3.1.3 重组蛋白的纯化及鉴定 | 第46-48页 |
| 3.2 DHX32单克隆抗体的筛选及制备 | 第48-51页 |
| 3.3 DHX32板式化学发光检测的初步建立 | 第51-56页 |
| 3.3.1 ELISA平台筛选双抗体夹心法配对 | 第51-53页 |
| 3.3.2 抗体配对在板式化学发光平台的优化 | 第53-54页 |
| 3.3.3 板式化学发光平台配对的灵敏度及线性评价 | 第54-56页 |
| 3.3.4 板式化学发光平台配对的精密度评价 | 第56页 |
| 3.4 结直肠癌组织中DHX32的检测 | 第56-57页 |
| 3.5 DHX32蛋白结构预测 | 第57-67页 |
| 3.5.1 DHX32蛋白保守区分析及功能预测 | 第57-59页 |
| 3.5.2 二级结构预测 | 第59-61页 |
| 3.5.3 三级结构预测 | 第61-64页 |
| 3.5.4 同源建模结果评价 | 第64-67页 |
| 第四章 讨论 | 第67-72页 |
| 4.1 影响原核表达的因素 | 第67-68页 |
| 4.2 影响单克隆抗体制备的因素 | 第68-69页 |
| 4.3 DHX32单抗在临床检测的初步应用分析 | 第69-70页 |
| 4.4 DHX32蛋白结构预测的分析 | 第70页 |
| 4.5 展望 | 第70-72页 |
| 结论 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 科研成果 | 第81页 |