摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
1 文献综述 | 第12-17页 |
1.1 糖尿病对男性生殖健康的危害 | 第12-13页 |
1.2 AGEs的研究进展 | 第13-15页 |
1.2.1 AGEs概述 | 第13-14页 |
1.2.2 AGEs损害机体机能的机制 | 第14-15页 |
1.3 AGEs和男性生殖健康 | 第15-16页 |
1.4 立题依据 | 第16-17页 |
1.4.1 研究目的 | 第16页 |
1.4.2 研究意义 | 第16-17页 |
2 AGEs对大鼠睾丸Leydig细胞睾酮分泌的影响 | 第17-27页 |
2.1 材料 | 第17-18页 |
2.1.1 实验动物 | 第17页 |
2.1.2 主要试剂 | 第17页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第17-18页 |
2.1.4 主要试剂的配制 | 第18页 |
2.2 方法 | 第18-20页 |
2.2.0 大鼠Leydig细胞的分离、纯化和鉴定 | 第18-19页 |
2.2.1 RT-PCR | 第19页 |
2.2.2 免疫荧光 | 第19-20页 |
2.2.3 AGEs的制备 | 第20页 |
2.2.4 MTT法测定Leydig细胞活力 | 第20页 |
2.2.5 Leydig细胞的处理 | 第20页 |
2.2.6 ELISA | 第20页 |
2.2.7 统计学分析 | 第20页 |
2.3 结果 | 第20-25页 |
2.3.1 大鼠Leydig细胞的培养与鉴定 | 第20-21页 |
2.3.2 RAGE在大鼠Leydig细胞上表达 | 第21-23页 |
2.3.3 AGEs对Leydig细胞活力的影响 | 第23页 |
2.3.4 AGEs抑制睾酮的产生 | 第23-25页 |
2.4 讨论 | 第25-26页 |
2.5 小结 | 第26-27页 |
3 AGEs抑制大鼠睾丸Leydig细胞睾酮分泌的机制 | 第27-44页 |
3.1 材料 | 第27-28页 |
3.1.1 实验动物 | 第27页 |
3.1.2 主要试剂 | 第27页 |
3.1.3 仪器与设备 | 第27页 |
3.1.4 主要试剂的配制 | 第27-28页 |
3.2 方法 | 第28-32页 |
3.2.1 Leydig细胞的分离、培养及处理 | 第28-29页 |
3.2.2 荧光定量PCR | 第29-30页 |
3.2.3 WesternBlot | 第30-32页 |
3.2.4 ELISA | 第32页 |
3.2.5 ROS的测定 | 第32页 |
3.2.6 统计学分析 | 第32页 |
3.3 结果 | 第32-39页 |
3.3.1 AGEs对3β-HSD、P450scc和StAR的mRNA转录的影响 | 第32-34页 |
3.3.2 AGEs对3β-HSD、P450scc和StAR蛋白表达的影响 | 第34-35页 |
3.3.3 NAC和TUDCA对AGEs抑制睾酮分泌的影响 | 第35-36页 |
3.3.4 AGEs诱导ROS的生成 | 第36-37页 |
3.3.5 Western检测AGEs对Leydig细胞ERS相关蛋白表达的影响 | 第37-38页 |
3.3.6 AGEs刺激睾丸Leydig细胞后p-ERK1/2蛋白水平的变化 | 第38-39页 |
3.4 讨论 | 第39-43页 |
3.4.1 AGEs对睾酮分泌过程中关键蛋白表达的影响 | 第39-40页 |
3.4.2 AGEs通过OS抑制睾酮的合成 | 第40-41页 |
3.4.3 AGEs通过ERS抑制睾酮的合成 | 第41-42页 |
3.4.4 AGEs通过ERK1/2通路抑制睾酮的合成 | 第42-43页 |
3.5 小结 | 第43-44页 |
4 结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
作者简介 | 第56-57页 |
导师简介 | 第57页 |