| 摘要 | 第3-6页 |
| abstract | 第6-9页 |
| 第一章 绪论 | 第14-28页 |
| 1.1 课题研究背景及意义 | 第14-15页 |
| 1.2 软骨细胞力学生物学研究背景 | 第15-20页 |
| 1.2.1 软骨及软骨细胞的生物结构与功能 | 第15-17页 |
| 1.2.2 软骨细胞力学微环境 | 第17-20页 |
| 1.3 软骨细胞力敏感离子通道 | 第20-24页 |
| 1.3.1 Piezo离子通道 | 第21-23页 |
| 1.3.2 TRPV4离子通道 | 第23-24页 |
| 1.4 论文的主要工作及研究意义 | 第24-28页 |
| 1.4.1 主要工作 | 第24-25页 |
| 1.4.2 研究意义 | 第25-28页 |
| 第二章 CTS对软骨功能性蛋白及力敏感蛋白表达的影响 | 第28-54页 |
| 2.1 引言 | 第28页 |
| 2.2 实验试剂与仪器 | 第28-32页 |
| 2.2.1 主要试剂 | 第28-30页 |
| 2.2.2 主要仪器 | 第30-32页 |
| 2.3 实验方法 | 第32-43页 |
| 2.3.1 小鼠原代软骨细胞的提取与培养 | 第32-33页 |
| 2.3.2 CTS力学加载 | 第33-35页 |
| 2.3.3 实时荧光定量PCR | 第35-40页 |
| 2.3.4 酶联免疫吸附实验 | 第40页 |
| 2.3.5 Westernblot | 第40-43页 |
| 2.4 实验结果 | 第43-49页 |
| 2.4.1 CTS对CollagenII及Aggrecan表达的影响 | 第43-44页 |
| 2.4.2 CTS对TRPV4表达的影响 | 第44-46页 |
| 2.4.3 CTS对Piezo1表达的影响 | 第46-47页 |
| 2.4.4 CTS对Piezo2表达的影响 | 第47-49页 |
| 2.5 结果讨论 | 第49-51页 |
| 2.6 本章小结 | 第51-54页 |
| 第三章 TRPV4及Piezo在CTS诱导软骨细胞钙信号中的作用研究 | 第54-86页 |
| 3.1 引言 | 第54页 |
| 3.2 实验试剂与仪器 | 第54-55页 |
| 3.2.1 主要试剂 | 第54-55页 |
| 3.2.2 主要仪器 | 第55页 |
| 3.3 实验方法 | 第55-60页 |
| 3.3.1 siRNA转染实验 | 第55-57页 |
| 3.3.2 siRNA毒性试验 | 第57-58页 |
| 3.3.3 钙成像方法 | 第58-60页 |
| 3.4 软骨细胞TRPV4及Piezo基因敲低模型的建立 | 第60-74页 |
| 3.4.1 siRNA转染浓度对基因敲低效果的影响 | 第60-65页 |
| 3.4.2 siRNA转染时间对基因敲低效果的影响 | 第65-70页 |
| 3.4.3 软骨细胞TRPV4、Piezo1、Piezo2基因敲低模型 | 第70-74页 |
| 3.5 TRPV4及Piezo在CTS诱导软骨细胞钙震荡中的作用研究 | 第74-82页 |
| 3.5.1 CTS对软骨细胞钙信号的调控 | 第74-77页 |
| 3.5.2 TRPV4及Piezo在3%CTS诱导的钙震荡中的作用研究 | 第77-78页 |
| 3.5.3 TRPV4及Piezo在8%CTS诱导的钙震荡中的作用研究 | 第78-80页 |
| 3.5.4 TRPV4及Piezo在13%CTS诱导的钙震荡中的作用研究 | 第80-81页 |
| 3.5.5 TRPV4及Piezo在18%CTS诱导的钙震荡中的作用研究 | 第81-82页 |
| 3.6 结果讨论 | 第82-84页 |
| 3.7 本章小结 | 第84-86页 |
| 第四章 基质刚度对软骨功能性蛋白及力敏感蛋白表达的调控 | 第86-100页 |
| 4.1 引言 | 第86页 |
| 4.2 实验试剂与仪器 | 第86-87页 |
| 4.2.1 主要试剂 | 第86-87页 |
| 4.2.2 主要仪器 | 第87页 |
| 4.3 实验方法 | 第87-90页 |
| 4.3.1 不同刚度PDMS基底的制备 | 第87-88页 |
| 4.3.2 AFM表征PDMS表面粗糙度 | 第88-90页 |
| 4.4 实验结果 | 第90-97页 |
| 4.4.1 基质刚度对CollagenII及Aggrecan表达的影响 | 第90-93页 |
| 4.4.2 基质刚度对TRPV4表达的调控 | 第93-94页 |
| 4.4.3 基质刚度对Piezo1表达的调控 | 第94-96页 |
| 4.4.4 基质刚度对Piezo2表达的调控 | 第96-97页 |
| 4.5 结果讨论 | 第97-99页 |
| 4.6 本章小结 | 第99-100页 |
| 第五章 TRPV4及Piezo在基质刚度诱导软骨细胞钙信号中的作用研究 | 第100-110页 |
| 5.1 引言 | 第100页 |
| 5.2 实验试剂与仪器 | 第100页 |
| 5.2.1 实验试剂 | 第100页 |
| 5.2.2 主要仪器 | 第100页 |
| 5.3 实验方法 | 第100-101页 |
| 5.4 TRPV4及Piezo在基质刚度诱导软骨细胞钙震荡中的作用研究 | 第101-107页 |
| 5.4.1 基质刚度对软骨细胞钙信号的调控 | 第101-103页 |
| 5.4.2 TRPV4及Piezo在30:1PDMS诱导的钙震荡中的作用研究 | 第103-104页 |
| 5.4.3 TRPV4及Piezo在40:1PDMS诱导的钙震荡中的作用研究 | 第104-105页 |
| 5.4.4 TRPV4及Piezo在50:1PDMS诱导的钙震荡中的作用研究 | 第105-106页 |
| 5.4.5 TRPV4及Piezo在70:1PDMS诱导的钙震荡中的作用研究 | 第106-107页 |
| 5.5 结果讨论 | 第107-109页 |
| 5.6 本章小结 | 第109-110页 |
| 第六章 全文总结与展望 | 第110-114页 |
| 6.1 主要结论 | 第110-111页 |
| 6.2 后续工作展望 | 第111-114页 |
| 参考文献 | 第114-126页 |
| 致谢 | 第126-128页 |
| 攻读博士学位期间发表学术论文 | 第128-130页 |
| 博士学位论文独创性声明 | 第130页 |
