| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 1. 前言 | 第12-23页 |
| 1.1 蛋白质质量控制系统 | 第12-16页 |
| 1.1.1 泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome system,UPS) | 第12-13页 |
| 1.1.2 蛋白质的泛素化修饰 | 第13页 |
| 1.1.3 蛋白质在26S蛋白酶体中的降解 | 第13-14页 |
| 1.1.4 去泛素化酶(Deubiquitinating enzyme,DUB) | 第14页 |
| 1.1.5 自噬-溶酶体通路(autophagy-lysosomal pathway, ALP) | 第14-15页 |
| 1.1.6 自噬-溶酶体通路的发生和检测方法 | 第15-16页 |
| 1.2 组蛋白去乙酰化酶6 (histone deacetylase 6,HDAC6) | 第16-17页 |
| 1.2.1 HDAC6的结构与功能 | 第16-17页 |
| 1.2.2 HDAC6在蛋白质降解中的作用 | 第17页 |
| 1.3 泛素化修饰在蛋白质降解中的作用 | 第17-18页 |
| 1.4 蛋白质异常聚集与神经退行性疾病 | 第18页 |
| 1.5 微管相关蛋白tau | 第18-20页 |
| 1.5.1 tau蛋白的分子结构与生物学功能 | 第18-19页 |
| 1.5.2 Tau蛋白病变与阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD) | 第19-20页 |
| 1.6 泛素C末端水解酶L1(Ubiquitin C-terminal hydrolase L1,UCH-L1) | 第20-22页 |
| 1.6.1 UCH-L1的结构与功能 | 第20-21页 |
| 1.6.2 UCH-L1与神经退行性疾病 | 第21-22页 |
| 1.7 本实验的目的和意义 | 第22-23页 |
| 2. 材料与方法 | 第23-30页 |
| 2.1 实验所用的化学试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.1 实验所用抗体 | 第23-24页 |
| 2.2 实验仪器 | 第24-25页 |
| 2.3 HEK293/tau441细胞培养 | 第25页 |
| 2.4 细胞加药处理 | 第25页 |
| 2.5 免疫荧光 | 第25-26页 |
| 2.6 免疫印迹 | 第26-28页 |
| 2.6.1 收集蛋白样品 | 第26页 |
| 2.6.2 BCA法测蛋白浓度 | 第26-27页 |
| 2.6.3 SDS-PAGE电泳 | 第27页 |
| 2.6.4 转膜 | 第27页 |
| 2.6.5 显色 | 第27-28页 |
| 2.7 HDAC6活性检测 | 第28页 |
| 2.8 免疫沉淀 | 第28-29页 |
| 2.9 统计学分析 | 第29-30页 |
| 3. 实验结果 | 第30-39页 |
| 3.1 蛋白酶体活性抑制诱导tau蛋白聚集体形成 | 第30-31页 |
| 3.2 UCH-L1活性抑制导致tau蛋白聚集体清除障碍 | 第31-33页 |
| 3.3 UCH-L1活性抑制下调K63水平 | 第33页 |
| 3.4 UCH-L1活性抑制导致K63与HDAC6亲和力下调 | 第33-34页 |
| 3.5 UCH-L1活性抑制下调HDAC6活性 | 第34-36页 |
| 3.6 HDAC6活性抑制诱导tau蛋白聚集体清除障碍 | 第36-37页 |
| 3.7 UCH-L1活性抑制下调自噬活性 | 第37-39页 |
| 4. 讨论 | 第39-42页 |
| 4.1 UCH-L1在tau蛋白聚集体清除过程中的作用 | 第39-40页 |
| 4.2 UCH-L1与K63连接的多聚泛素链形成之间的关系 | 第40-41页 |
| 4.3 UCH-L1对HDAC6活性的影响以及HDAC6活性改变对tau蛋白聚集体清除的影响 | 第41-42页 |
| 5. 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-52页 |
| 附录 | 第52-53页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
