| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 本实验所需的器材及试剂 | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-22页 |
| 1.1 铁蛋白的概述 | 第12-20页 |
| 1.1.1 铁蛋白的结构 | 第12-14页 |
| 1.1.2 铁蛋白的生物特性 | 第14-17页 |
| 1.1.3 典型蛋白 | 第17-20页 |
| 1.2 本课题研究意义及技术路线 | 第20-22页 |
| 1.2.1 研究现状及意义 | 第20-21页 |
| 1.2.2 技术路线 | 第21-22页 |
| 第二章 多因子刺激池蝶蚌Ferritin-1/-2 的差异表达 | 第22-34页 |
| 2.1 材料方法 | 第22-26页 |
| 2.1.1 材料 | 第22页 |
| 2.1.2 取材准备 | 第22-23页 |
| 2.1.3 RNA的提取 | 第23-24页 |
| 2.1.4 引物合成 | 第24页 |
| 2.1.5 cDNA的合成 | 第24-25页 |
| 2.1.6 实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测 | 第25-26页 |
| 2.1.7 数据分析 | 第26页 |
| 2.2 结果与分析 | 第26-32页 |
| 2.2.1 细菌刺激池蝶蚌Ferritin-1/-2 的差异性表达 | 第26-28页 |
| 2.2.2 Cu~（2+）、Pb~（2+）刺激池蝶蚌Ferritin-1/-2 的差异性表达 | 第28-30页 |
| 2.2.3 Fe~（3+）刺激池蝶蚌Ferritin-1/-2 的差异性表达 | 第30-31页 |
| 2.2.4 人工插核，手术损伤下池蝶蚌Ferritin-1/-2 的差异性表达 | 第31-32页 |
| 2.3 讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 池蝶蚌铁蛋白抑菌活性及螯合活性分析 | 第34-43页 |
| 3.1 实验材料 | 第34页 |
| 3.2 实验方法 | 第34-36页 |
| 3.2.1 细菌的复苏与扩培 | 第34-35页 |
| 3.2.2 融合蛋白rHsFer-1 和rHsFer-2 的抑菌实验 | 第35页 |
| 3.2.3 融合蛋白rHsFer-1 与Fe~（3+）的螯合 | 第35页 |
| 3.2.4 rHsFer1Fe~（3+）螯合物的抑菌检测 | 第35-36页 |
| 3.3 结果分析 | 第36-41页 |
| 3.3.1 融合蛋白检测 | 第36页 |
| 3.3.2 融合蛋白rHsFer-1 和rHsFer-2 的抑菌分析 | 第36-39页 |
| 3.3.3 融合蛋白rHsFer-1 与Fe~（3+）的螯合分析 | 第39-40页 |
| 3.3.4 rHsFer1Fe~（3+）螯合物的抑菌分析 | 第40-41页 |
| 3.4 讨论 | 第41-43页 |
| 第四章 RNAi干扰技术探究Ferritin-1/-2 的相互关系 | 第43-56页 |
| 4.1 实验材料 | 第43页 |
| 4.2 实验方法 | 第43-47页 |
| 4.2.1 多克隆抗体的制备 | 第43-45页 |
| 4.2.2 池蝶蚌血细胞的体外培养探究 | 第45页 |
| 4.2.3 RNAi干扰技术 | 第45-47页 |
| 4.3 结果分析 | 第47-54页 |
| 4.3.1 抗体检测 | 第47-48页 |
| 4.3.2 血细胞体外培养活性鉴定 | 第48-50页 |
| 4.3.4 mRNA水平分析沉默及干扰效果 | 第50-51页 |
| 4.3.5 蛋白质水平分析沉默及干扰效果 | 第51-54页 |
| 4.4 讨论 | 第54-56页 |
| 第五章 Ferritin在肝胰腺细胞及血细胞的显微定位 | 第56-70页 |
| 5.1 实验方法 | 第56-62页 |
| 5.1.1 肝胰腺细胞的冰冻切片 | 第56-57页 |
| 5.1.2 肝胰腺细胞中蛋白定位 | 第57页 |
| 5.1.3 真核重组质粒的获取 | 第57-61页 |
| 5.1.4 血细胞的培养 | 第61页 |
| 5.1.5 瞬时转染 | 第61-62页 |
| 5.2 结果分析 | 第62-69页 |
| 5.2.1 肝胰腺细胞HE染色分析 | 第62-63页 |
| 5.2.2 HsFer在肝胰腺细胞中免疫荧光定位分析 | 第63-65页 |
| 5.2.3 HsFer-1/-2 开放阅读框的获得 | 第65-66页 |
| 5.2.4 载体的获得 | 第66页 |
| 5.2.5 重组子的筛选 | 第66-67页 |
| 5.2.6 真核重组载体转染结果分析 | 第67-69页 |
| 5.3 讨论 | 第69-70页 |
| 第六章 结论与展望 | 第70-72页 |
| 6.1 结论 | 第70页 |
| 6.2 进一步的工作 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第83页 |
