| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 符号说明 | 第7-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-24页 |
| 1.1 miRNA的研究进展 | 第12-17页 |
| 1.1.1 miRNA概述 | 第12-13页 |
| 1.1.2 miRNA的生物发生 | 第13-14页 |
| 1.1.3 miRNA的调控 | 第14-15页 |
| 1.1.4 miRNA与靶基因的分子机制 | 第15页 |
| 1.1.5 miRNA与肿瘤 | 第15-16页 |
| 1.1.6 miR-192和miR-204在肿瘤中的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.2 lncRNA的研究进展 | 第17-21页 |
| 1.2.1 lncRNA概述 | 第17页 |
| 1.2.2 lncRNA的生物学功能及其分子机制 | 第17-19页 |
| 1.2.3 lncRNA与肿瘤 | 第19-21页 |
| 1.2.4 HOTTIP简介及其在肿瘤中的研究进展 | 第21页 |
| 1.3 GLS简介及其在肿瘤中的研究进展 | 第21-23页 |
| 1.4 立题背景与研究意义 | 第23-24页 |
| 第二章 实验方法 | 第24-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-30页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第24-25页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第26-27页 |
| 2.1.4 实验所需溶液 | 第27-28页 |
| 2.1.5 引物和mimics | 第28-30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-40页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第30页 |
| 2.2.2 瞬时转染 | 第30-31页 |
| 2.2.3 提取RNA | 第31-32页 |
| 2.2.4 实时定量PCR检测miRNA的转染效率(polyA加尾法) | 第32-33页 |
| 2.2.5 实时定量PCR检测mRNA的表达 | 第33-34页 |
| 2.2.6 双荧光素酶报告基因实验 | 第34-35页 |
| 2.2.7 细胞增殖实验 | 第35页 |
| 2.2.8 流式细胞术 | 第35-36页 |
| 2.2.9 克隆形成实验 | 第36-37页 |
| 2.2.10 划痕实验 | 第37页 |
| 2.2.11 亚细胞分离定位HOTTIP | 第37-38页 |
| 2.2.12 基因表达谱 | 第38页 |
| 2.2.13 患者与组织分析 | 第38页 |
| 2.2.14 裸鼠移植瘤模型实验 | 第38-39页 |
| 2.2.15 数据分析 | 第39-40页 |
| 第三章 实验结果 | 第40-62页 |
| 3.1 生物信息学分析预测靶向HOTTIP的miRNA | 第40-41页 |
| 3.2 确定靶向HOTTIP的miRNA | 第41-43页 |
| 3.3 miR-192与miR-204在转录后水平调控HOTTIP | 第43-45页 |
| 3.4 miR-192与miR-204抑制肝细胞癌细胞增殖 | 第45-50页 |
| 3.5 miR-192与miR-204可影响多个HOTTIP下游基因 | 第50-55页 |
| 3.6 在肝癌组织中miR-192、miR-204与HOTTIP负相关 | 第55-58页 |
| 3.7 在体内miR-192、miR-204可抑制肝细胞癌的生长 | 第58-62页 |
| 第四章 结论 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-68页 |
| 致谢 | 第68-70页 |
| 研究成果及发表的学术论文 | 第70-72页 |
| 作者和导师简介 | 第72-73页 |
| 附件 | 第73-74页 |
