摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第一章 绪论 | 第13-27页 |
1.1 核酸扩增技术简介 | 第13-17页 |
1.1.1 变温扩增体系 | 第13-17页 |
1.1.2 恒温扩增体系 | 第17页 |
1.2. 恒温扩增技术 | 第17-20页 |
1.2.1 核酸序列依赖性扩增 | 第17-18页 |
1.2.2 解旋酶依赖的核酸扩增 | 第18页 |
1.2.3 重组酶聚合酶扩增 | 第18-19页 |
1.2.4 环介导的恒温扩增 | 第19页 |
1.2.5 DNA链置换扩增 | 第19页 |
1.2.6 滚环扩增技术 | 第19-20页 |
1.3 滚环扩增技术 | 第20-25页 |
1.3.1 滚环扩增技术分类及特性 | 第20-23页 |
1.3.2 滚环扩增技术的应用 | 第23-25页 |
1.4 本论文的主要研究内容 | 第25-27页 |
第二章 还原石墨烯辅助的核酸滚环扩增用于MicroRNA单核苷酸多态性检测 | 第27-45页 |
2.1. 引言 | 第27-29页 |
2.2 实验材料与方法 | 第29-32页 |
2.2.1 试剂和仪器 | 第29-30页 |
2.2.2 还原石墨烯辅助的滚环扩增反应 | 第30页 |
2.2.3 电泳检测 | 第30页 |
2.2.4 原子力显微镜表征 | 第30-31页 |
2.2.5 实时荧光定量PCR检测 | 第31页 |
2.2.6 荧光分析 | 第31-32页 |
2.2.7 傅里叶红外光谱表征 | 第32页 |
2.3.结果与讨论 | 第32-44页 |
2.3.1 还原石墨烯辅助的滚环扩增反应体系的构建 | 第32-34页 |
2.3.2 氧化石墨烯与还原石墨烯对滚环扩增效果的影响 | 第34-35页 |
2.3.3 原子力显微镜及荧光定量表征 | 第35-37页 |
2.3.4 还原石墨烯辅助提高RCA特异性原理的探讨 | 第37-39页 |
2.3.5 还原石墨烯辅助的核酸滚环扩增实验条件优化 | 第39-41页 |
2.3.6 还原石墨烯辅助的RCA用于miRNA定量检测 | 第41-44页 |
2.4.结论 | 第44-45页 |
第三章 末端封闭的核酸滚环扩增用于 DNA 断裂事件的检测 | 第45-57页 |
3.1.引言 | 第45页 |
3.2.实验材料与方法 | 第45-48页 |
3.2.1 试剂和仪器 | 第45-47页 |
3.2.2 末端封闭的核酸滚环扩增反应 | 第47页 |
3.2.3 电泳检测 | 第47-48页 |
3.2.4 荧光光度检测 | 第48页 |
3.3 结果与讨论 | 第48-56页 |
3.3.1 末端封闭的核酸滚环扩增用于DNA断裂事件检测原理 | 第48-49页 |
3.3.2 最适引物长度的研究 | 第49-50页 |
3.3.3 最适末端封闭长度的研究 | 第50-51页 |
3.3.4 末端封闭的核酸滚环扩增用于Fenton反应引起的DNA断裂事件的检测 .. 42 3.3.5 Fenton反应时间影响的研究 | 第51-52页 |
3.3.5 Fenton 反应时间影响的研究 | 第52页 |
3.3.6 最佳滚环扩增时间的研究 | 第52-53页 |
3.3.7 最佳BST聚合酶浓度的研究 | 第53-54页 |
3.3.8 引物末端封闭的核酸滚环扩增用于Fenton反应的定量研究 | 第54-55页 |
3.3.9 引物末端封闭的滚环扩增用于切刻内切酶引起DNA断裂事件的检测 | 第55-56页 |
3.4 结论 | 第56-57页 |
总结与展望 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-69页 |
附录 | 第69-70页 |
作者在攻读硕士学位期间公开发表的论文和专利 | 第70-72页 |
致谢 | 第72页 |