| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 前言 | 第11-16页 |
| 第一部分ClC-3 参与肿瘤耐药 | 第16-38页 |
| 1 材料 | 第16-18页 |
| 1.1 细胞株、质粒及主要试剂 | 第16-17页 |
| 1.2 Si-ClC-3 序列 | 第17页 |
| 1.3 实验动物 | 第17-18页 |
| 1.4 主要设备 | 第18页 |
| 2 方法 | 第18-25页 |
| 2.1 细胞培养 | 第18-19页 |
| 2.2 Western blot检测细胞中ClC-3 蛋白及P-gp的表达 | 第19-21页 |
| 2.3 体外转染Si-ClC-3 | 第21页 |
| 2.4 体外转染pc DNA3.1/ClC-3 表达质粒 | 第21页 |
| 2.5 MTT法检测抗癌药物紫杉醇对细胞增殖的影响 | 第21-23页 |
| 2.6 双转基因乳腺癌小鼠模型的建立 | 第23-24页 |
| 2.7 转基因小鼠分组和给药方案 | 第24-25页 |
| 2.8 数据统计与处理 | 第25页 |
| 3 实验结果 | 第25-34页 |
| 3.1 ClC-3 蛋白和P-gp在耐药细胞株中的表达高于非耐药细胞 | 第25-26页 |
| 3.2 耐药细胞ClC-3 表达抑制可增加细胞对抗癌药物的敏感性、非耐药细胞ClC-3表达增加可降低细胞对抗癌药物的敏感性 | 第26-27页 |
| 3.3 各组小鼠及瘤体的生长情况 | 第27-33页 |
| 3.3.1 各组小鼠体重、肿瘤生长情况及不同时间点的抑瘤率 | 第28-31页 |
| 3.3.2 各组小鼠瘤重、瘤体积、抑瘤率差异 | 第31-33页 |
| 3.4 各组小鼠生存期差异 | 第33-34页 |
| 4 讨论 | 第34-38页 |
| 5 小结 | 第38页 |
| 第二部分ClC-3 通过调控P-gp介导肿瘤耐药 | 第38-62页 |
| 1 材料 | 第39-40页 |
| 1.1 荧光定量PCR引物序列及主要试剂 | 第39页 |
| 1.2 Si-ClC-3、Si-MDR1序列 | 第39-40页 |
| 1.3 实验动物 | 第40页 |
| 2 方法 | 第40-46页 |
| 2.1 体外转染Si-ClC-3、Si-MDR1 | 第40页 |
| 2.2 体外转染pc DNA3.1/ClC-3 表达质粒、pc DNA3.1/MDR1表达质粒 | 第40页 |
| 2.3 免疫荧光检测细胞中ClC-3 蛋白及P-gp的表达 | 第40-41页 |
| 2.4 Western blot检测细胞中ClC-3 蛋白及P-gp的表达 | 第41-42页 |
| 2.5 Real-Time PCR检测肿瘤组织中ClC-3 及MDR1 m RNA的表达 | 第42-44页 |
| 2.6 Western blot检测肿瘤组织中ClC-3 及P-gp蛋白的表达 | 第44页 |
| 2.7 瘤体病理组织学观察 | 第44页 |
| 2.8 免疫组化检测肿瘤组织ClC-3 蛋白及P-gp的表达 | 第44-45页 |
| 2.9 数据统计与处理 | 第45-46页 |
| 3 实验结果 | 第46-58页 |
| 3.1 耐药细胞中ClC-3 表达抑制可降低P-gp的表达，MDR1表达抑制对ClC-3 蛋白的表达无影响 | 第46-48页 |
| 3.2 非耐药细胞中ClC-3 表达增加可提高P-gp的表达，MDR1表达增加对ClC-3蛋白的表达无影响 | 第48-51页 |
| 3.3 耐药细胞ClC-3 表达抑制可降低P-gp的表达，非耐药细胞ClC-3 表达增加可提高P-gp的表达 | 第51-52页 |
| 3.4 耐药细胞P-gp表达抑制及非耐药细胞P-gp表达增加对ClC-3 蛋白的表达无影响 | 第52-53页 |
| 3.5 MMTV-Py MT/CLCN3双转基因小鼠肿瘤组织中MDR1及ClC-3 m RNA的表达都明显高于MMTV-Py MT单转基因小鼠 | 第53-55页 |
| 3.6 MMTV-Py MT/CLCN3双转基因小鼠肿瘤组织中多药耐药蛋白P-gp及ClC-3 蛋白的表达都明显高于MMTV-Py MT单转基因小鼠 | 第55-56页 |
| 3.7 瘤组织病理学观察 | 第56-57页 |
| 3.8 MMTV-Py MT/CLCN3双转基因小鼠肿瘤组织中P-gp及ClC-3 蛋白的表达都明显高于MMTV-Py MT单转基因小鼠 | 第57-58页 |
| 4 讨论 | 第58-61页 |
| 5 小结 | 第61-62页 |
| 全文结论 | 第62页 |
| 展望 | 第62-63页 |
| References | 第63-71页 |
| 附录一 硕士期间发表的论文 | 第71-72页 |
| 附录二 中英文缩写词对照表 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
