中文摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
1. 绪论 | 第13-19页 |
2. 材料与方法 | 第19-41页 |
2.1.主要仪器设备 | 第19页 |
2.2.实验动物及操作 | 第19-20页 |
2.3.表达质粒的构建及细胞培养 | 第20-21页 |
2.4.细胞形态学染色(瑞氏-吉姆萨染色) | 第21-22页 |
2.5.U937 细胞中 RIG-Ⅰ 四环素诱导表达(Tet-off)系统的建立 | 第22-23页 |
2.6.蛋白免疫印迹(Western Blot)相关材料与方法 | 第23-25页 |
2.7.免疫荧光(Immunofluorescence) | 第25-26页 |
2.8.免疫沉淀(Immunoprecipitation) | 第26页 |
2.9.细胞流式染色: | 第26-28页 |
2.10、逆转录病毒载体构建及病毒的包装和感染 | 第28页 |
2.11、融合蛋白表达和纯化 | 第28-29页 |
2.12、基因敲低实验 | 第29-30页 |
2.13、白血病小鼠模型构建及传代 | 第30-33页 |
2.14、PI3K 激酶活性测定 | 第33页 |
2.15、Realtime PCR 试验 | 第33-35页 |
2.16、荧光素酶报告实验 | 第35页 |
2.17、集落生成试验 | 第35页 |
2.18、细胞胞浆与脂筏成分的分离 | 第35-36页 |
2.19、酶联免疫吸附实验(ELISA) | 第36页 |
2.20、凝胶过滤(分子筛)实验 | 第36-37页 |
2.21、细胞转染 | 第37-39页 |
2.22、GST-pull down 实验 | 第39-40页 |
2.23、统计学分析 | 第40-41页 |
3. 结果 | 第41-64页 |
3.1.RIG-Ⅰ 的表达和 NB4 细胞的分化相关 | 第41页 |
3.2.RIG-Ⅰ 促进 U937 细胞的死亡 | 第41-42页 |
3.3.RIG-Ⅰ 抑制 AKT-mTOR 的活化 | 第42-44页 |
3.4.RIG-Ⅰ 不通过 AMPK 通路抑制 AKT-mTOR 的活化 | 第44-46页 |
3.5.RIG-Ⅰ 通过和 Src 相互作用抑制 AKT-mTOR 的活化 | 第46-48页 |
3.6.RIG-Ⅰ 与 Src 相互作用的影响因素 | 第48-50页 |
3.7.RIG-Ⅰ 与 Src 家族成员的关系及其对原代病人白血病细胞与小鼠白血病细胞的影响 | 第50-52页 |
3.8.在白血病病人原代细胞中 RIG-Ⅰ 的低表达和 AKT 的过度活化相关 | 第52-54页 |
3.9.RIG-Ⅰ 和 Src 相互作用的结构域分析 | 第54-55页 |
3.10.RIG-Ⅰ 通过 CARD 和 PxxP 结构域协同调节 Src 与 AKT 的相互作用 | 第55-58页 |
3.11.Rig-Ⅰ通过 Src 抑制 Akt-mTor 的活化阻止髓系祖细胞的增殖 | 第58-60页 |
3.12.Rig-Ⅰ通过 Src-Akt 调控白血病细胞体内外的增殖 | 第60-61页 |
3.13.Rig-Ⅰ对白血病细胞体内增殖和小鼠生存周期的影响 | 第61-64页 |
4. 讨论 | 第64-67页 |
5. 结论 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-75页 |
致谢 | 第75-77页 |
学术论文和科研成果目录 | 第77页 |