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AtCBF3提高转基因马铃薯耐热性的研究

符号说明第4-8页
中文摘要第8-10页
Abstract第10-11页
1 前言第12-23页
    1.1 植物对高温的应答第12-17页
        1.1.1 高温胁迫对细胞膜的影响第13-14页
        1.1.2 高温胁迫对植物光合作用的影响第14-15页
        1.1.3 高温胁迫对活性氧代谢的影响第15页
        1.1.4 高温胁迫对渗透调节物质的影响第15-16页
        1.1.5 高温胁迫对热激蛋白的影响第16-17页
    1.2 CBF基因家族第17-21页
        1.2.1 CBF的发现第18-19页
        1.2.2 CBF与植物的抗逆性第19-21页
        1.2.3 CBF基因的组织特异性表达第21页
    1.3 研究目的及意义第21-23页
2 材料与方法第23-33页
    2.1 实验材料与处理第23-25页
        2.1.1 实验材料第23页
        2.1.2 植物材料培养与处理第23页
        2.1.3 主要仪器第23页
        2.1.4 酶及生化试剂第23-24页
        2.1.5 PCR引物第24-25页
    2.2 实验方法第25-32页
        2.2.1 马铃薯茎尖组织培养第25页
        2.2.2 总RNA的提取第25页
        2.2.3 反转录获得cDNA第一条链第25-26页
        2.2.4 PCR扩增第26页
        2.2.5 实时定量PCR第26-27页
        2.2.6 Western杂交检测第27-30页
            2.2.6.1 植物总蛋白的提取第27-28页
            2.2.6.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第28-29页
            2.2.6.3 半干法转移蛋白第29-30页
            2.2.6.4 封闭及杂交第30页
            2.2.6.5 显色第30页
        2.2.7 生理指标的测定第30-32页
            2.2.7.1 光合速率的测定第30-31页
            2.2.7.2 调制式荧光仪荧光参数的测定第31页
            2.2.7.3 快速叶绿素荧光诱导曲线的测定第31页
            2.2.7.4 H_2O_2含量和O_2·~-产生速率的测定第31页
            2.2.7.5 抗氧化酶活性的测定第31-32页
            2.2.7.6 DAB和NBT染色第32页
            2.2.7.7 抗坏血酸含量的测定第32页
    2.3 统计分析第32-33页
3 结果与分析第33-58页
    3.1 AtCBF3的表达对马铃薯生长发育与叶片形态的影响第33页
    3.2 不同温度胁迫下野生型和转AtCBF3马铃薯耐热性的比较第33-40页
        3.2.1 AtCBF3在植物不同部位、不同温度和不同处理时间条件下,表达量的比较第33-35页
        3.2.2 不同高温胁迫下AtCBF3的表达对马铃薯叶片脯氨酸和可溶性糖含量的影响第35-36页
        3.2.3 不同高温胁迫下AtCBF3的表达对马铃薯叶片快速荧光诱导动力学曲线(OJIP)的影响第36-40页
    3.3 40℃胁迫下野生型和转AtCBF3马铃薯耐热性的比较第40-58页
        3.3.1 40℃胁迫下AtCBF3的表达对马铃薯叶片光合速率的影响第40-41页
        3.3.2 40℃胁迫下AtCBF3的表达对马铃薯叶片叶绿素荧光的影响第41-47页
        3.3.3 40℃胁迫下AtCBF3的表达对马铃薯叶片D1蛋白的影响第47-48页
        3.3.4 40℃胁迫下AtCBF3的表达对马铃薯叶片活性氧水平的影响第48-50页
        3.3.5 40℃胁迫下AtCBF3的表达对马铃薯叶片抗坏血酸含量的影响第50-51页
        3.3.6 40℃胁迫下AtCBF3的表达对马铃薯叶片抗氧化酶活性的影响第51页
        3.3.7 40℃胁迫下AtCBF3的表达对马铃薯叶片脯氨酸和可溶性糖含量的影响第51-52页
        3.3.8 40℃胁迫下AtCBF3的表达对马铃薯叶片丙二醛含量和相对电导率的影响第52-53页
        3.3.9 40℃处理前后,野生型和转基因马铃薯叶片中AtCBF3表达量的比较第53-54页
        3.3.10 40℃胁迫下AtCBF3的表达对马铃薯叶片部分基因的影响第54-56页
        3.3.11 40℃胁迫下AtCBF3的表达对马铃薯叶片HSP70的影响第56-57页
        3.3.12 钙离子对AtCBF3表达的影响第57-58页
4 讨论第58-62页
5 结论第62-63页
参考文献第63-75页
致谢第75-76页
攻读学位期间发表论文情况第76页

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