中文摘要 | 第7-11页 |
英文摘要 | 第11-15页 |
(一)前言 | 第16-17页 |
(二)实验材料和方法 | 第17-27页 |
1.材料 | 第17-20页 |
1.1 细胞株和试剂 | 第17-18页 |
1.2 相关试剂配制 | 第18页 |
1.3 检测引物信息 | 第18-19页 |
1.4 siRNA片段合成信息 | 第19页 |
1.5 主要仪器 | 第19-20页 |
2.实验方法 | 第20-27页 |
2.1 细胞培养 | 第20-21页 |
2.2 Tim-3 siRNA干扰序列的筛选 | 第21-22页 |
2.3 不同浓度葡萄糖处理 | 第22页 |
2.4 Real-time PCR检测目标基因mRNA表达水平 | 第22-23页 |
2.5 Western blot检测目标蛋白表达水平 | 第23-26页 |
2.6 细胞划痕检测细胞迁移 | 第26页 |
2.7 Transwell检测细胞迁移 | 第26-27页 |
3.统计学分析 | 第27页 |
(三)结果 | 第27-38页 |
1.筛选沉默效果最佳的Tim3 siRNA | 第27-28页 |
1.1 Real-time PCR检测结果 | 第27-28页 |
1.2 Western blot检测结果 | 第28页 |
2.细胞形态学观察 | 第28-29页 |
3.细胞迁移能力检测 | 第29-34页 |
3.1 细胞划痕实验 | 第29-32页 |
3.2 Transwell实验 | 第32-34页 |
4.移动标志相关分子mRNA表达水平变化 | 第34-35页 |
5.Western blot检测E-cadherin、α-catenin、Vimentin和ZEB1蛋白表达 | 第35-38页 |
(四)讨论 | 第38-41页 |
(五)结论 | 第41-42页 |
(六)参考文献 | 第42-45页 |
综述 | 第45-57页 |
参考文献 | 第52-57页 |
致谢 | 第57-58页 |