| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-18页 |
| 1.1 小麦贮藏蛋白的组成和分类 | 第12-13页 |
| 1.2 HMW-GS 研究概况 | 第13-15页 |
| 1.2.1 HMW-GS 的命名 | 第13-14页 |
| 1.2.2 HMW-GS 基因的染色体定位及遗传多样性 | 第14页 |
| 1.2.3 HMW-GS 结构特征 | 第14-15页 |
| 1.3 HMW-GS 分离和鉴定 | 第15-16页 |
| 1.3.1 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第15页 |
| 1.3.2 质谱技术鉴定 HMW-GS | 第15-16页 |
| 1.4 HMW-GS 的分子克隆研究进展 | 第16页 |
| 1.5 HMW-GS 等位变异与品质的关系 | 第16页 |
| 1.6 评定小麦面粉品质的指标 | 第16-17页 |
| 1.7 小麦地方品种 HMW-GS 变异类型 | 第17页 |
| 1.8 本实验的目的及意义 | 第17-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-29页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第18-19页 |
| 2.1.1 材料 | 第18页 |
| 2.1.2 仪器 | 第18页 |
| 2.1.3 菌株、载体、酶和试剂盒 | 第18-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-29页 |
| 2.2.1 SDS-PAGE 分析半截芒 HMW-GS | 第19-20页 |
| 2.2.1.1 HMW-GS 提取 | 第19页 |
| 2.2.1.2 SDS-PAGE | 第19-20页 |
| 2.2.2 目的基因的扩增与片段回收 | 第20-23页 |
| 2.2.2.1 引物设计与合成 | 第20页 |
| 2.2.2.2 基因组 DNA 的提取 | 第20-21页 |
| 2.2.2.3 目的基因的扩增 | 第21-22页 |
| 2.2.2.4 目的片段的回收 | 第22-23页 |
| 2.2.3 Glu-B1 位点 HMW-GS 基因的克隆 | 第23页 |
| 2.2.3.1 目的片段与克隆载体连接 | 第23页 |
| 2.2.3.2 连接产物转化大肠杆菌 DH5α | 第23页 |
| 2.2.4 目的基因序列分析 | 第23-24页 |
| 2.2.5 原核表达 | 第24-28页 |
| 2.2.5.1 原核表达引物的设计 | 第24页 |
| 2.2.5.2 表达载体的选择 | 第24-25页 |
| 2.2.5.3 成熟蛋白编码区的克隆 | 第25-26页 |
| 2.2.5.4 阳性克隆菌株质粒的提取 | 第26页 |
| 2.2.5.5 质粒、原核表达载体的双酶切和连接 | 第26-27页 |
| 2.2.5.6 转化 DH5α筛选阳性克隆 | 第27页 |
| 2.2.5.7 转化 E. coli BL21（DE3） | 第27页 |
| 2.2.5.8 IPTG 诱导重组质粒的表达 | 第27-28页 |
| 2.2.5.9 SDS-PAGE 电泳检测表达蛋白 | 第28页 |
| 2.2.6 质谱鉴定目的亚基 | 第28页 |
| 2.2.7 半截芒 SDS-沉降值的测定 | 第28-29页 |
| 第三章 结果与分析 | 第29-39页 |
| 3.1 SDS-PAGE 分析 | 第29页 |
| 3.2 目的基因克隆与氨基酸序列分析 | 第29-34页 |
| 3.2.1 PCR 扩增与克隆 | 第29-30页 |
| 3.2.2 氨基酸序列比较与分析 | 第30-34页 |
| 3.3 系统进化树分析 | 第34页 |
| 3.4 原核表达载体的构建与重组子鉴定 | 第34-35页 |
| 3.5 原核表达产物的 SDS-PAGE 分析 | 第35-36页 |
| 3.6 LC-ESI-MS 结果分析 | 第36-37页 |
| 3.7 SDS-沉降值 | 第37-39页 |
| 第四章 讨论 | 第39-42页 |
| 4.1 本研究的意义 | 第39页 |
| 4.2 PCR 体系的改进 | 第39-40页 |
| 4.3 目的基因的原核表达 | 第40页 |
| 4.4 HMW-GS 结构与品质的关系 | 第40页 |
| 4.5 HMW-GS 等位变异与品质的关系 | 第40-41页 |
| 4.6 小麦地方品种的优质基因 | 第41页 |
| 4.7 展望 | 第41-42页 |
| 第五章 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 作者简介 | 第50页 |
