摘要 | 第2-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
缩略词简表 | 第7-8页 |
第一章 引言 | 第8-10页 |
第二章 材料和方法 | 第10-19页 |
2.1 主要试剂 | 第10-11页 |
2.1.1 载体构建试剂 | 第10页 |
2.1.2 细胞培养试剂 | 第10页 |
2.1.3 分子检测实验试剂 | 第10-11页 |
2.1.4 主要仪器 | 第11页 |
2.2 滑膜细胞的体外培养 | 第11-12页 |
2.3 慢病毒载体介导IL-1Ra的载体构建和病毒包装 | 第12-15页 |
2.3.1 oligo设计 | 第12-13页 |
2.3.2 回收homo-IL1RN基因片段 | 第13-14页 |
2.3.3 目的基因homo-IL1RN克隆到载体LV5中 | 第14-15页 |
2.3.4 重组质粒测序验证并大量抽提 | 第15页 |
2.4 靶细胞的体外转染 | 第15-16页 |
2.4.1 转染预实验测定MOI值 | 第15-16页 |
2.4.2 靶细胞体外转染正式试验 | 第16页 |
2.5 酶联免疫吸附剂测定(Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay,ELISA) | 第16-17页 |
2.6 免疫组化染色测定IL-1Ra表达 | 第17-19页 |
第三章 实验结果 | 第19-22页 |
3.1 细胞形态学观察 | 第19页 |
3.2 荧光显微镜观察转染效率 | 第19-20页 |
3.3 ELISA检测转染后72h细胞培养上清液IL-1Ra表达 | 第20-21页 |
3.4 IL-1Ra免疫组织化学染色 | 第21-22页 |
第四章 讨论 | 第22-25页 |
第五章 结论 | 第25-26页 |
参考文献 | 第26-29页 |
综述 | 第29-38页 |
参考文献 | 第35-38页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第38-39页 |
致谢 | 第39-40页 |