| 缩略词表 | 第7-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 前言 | 第15-20页 |
| 第一部分 寨卡病毒micro RNA靶向减毒疫苗株的构建与鉴定 | 第20-50页 |
| 1 引言 | 第20页 |
| 2 材料 | 第20-22页 |
| 2.1 病毒毒株、菌株、细胞系、质粒以及实验动物 | 第20-21页 |
| 2.2 实验试剂和仪器 | 第21-22页 |
| 3 方法 | 第22-39页 |
| 3.1 ZIKV重组病毒全长感染性克隆构建策略 | 第22-24页 |
| 3.2 构建方法 | 第24-35页 |
| 3.3 恢复病毒的传代和扩大培养 | 第35页 |
| 3.4 恢复病毒基因组的RT-PCR鉴定 | 第35-37页 |
| 3.5 恢复病毒的噬斑形成实验 | 第37页 |
| 3.6 恢复病毒的间接免疫荧光荧光实验 | 第37-38页 |
| 3.7 重组病毒基因组二级结构预测 | 第38-39页 |
| 3.8 重组病毒稳定性研究 | 第39页 |
| 3.9 重组病毒在乳鼠颅内神经毒力评价 | 第39页 |
| 4 结果 | 第39-49页 |
| 4.1 PCR扩增各分片段 | 第39-40页 |
| 4.2 融合PCR方法扩增各目的片段 | 第40-41页 |
| 4.3 双酶切质粒及融合片段 | 第41页 |
| 4.4 重组克隆质粒线性化及酚氯仿抽提产物鉴定结果 | 第41-42页 |
| 4.5 体外转录重组病毒克隆质粒的产物鉴定 | 第42-43页 |
| 4.6 寨卡重组病毒基因组的RT-PCR鉴定 | 第43-44页 |
| 4.7 寨卡重组病毒的空斑形态 | 第44页 |
| 4.8 寨卡重组病毒的间接免疫荧光分析 | 第44-45页 |
| 4.9 寨卡重组病毒基因组二级结构预测 | 第45-46页 |
| 4.10 寨卡重组病毒体外稳定性研究 | 第46-47页 |
| 4.11 寨卡重组病毒与亲本株的神经毒力评价 | 第47-49页 |
| 5 讨论 | 第49-50页 |
| 第二部分 寨卡病毒micro RNA靶向减毒疫苗株的免疫原性与保护评价 | 第50-61页 |
| 1 引言 | 第50页 |
| 2 材料 | 第50-51页 |
| 2.1 毒株和实验动物 | 第50页 |
| 2.2 试剂与仪器 | 第50-51页 |
| 3 方法 | 第51-53页 |
| 3.1 重组病毒在不同细胞系中的生长特征鉴定 | 第51页 |
| 3.2 转染mi RNA mimics后对重组病毒的影响 | 第51-52页 |
| 3.3 动物免疫 | 第52页 |
| 3.4 重组病毒在乳鼠颅内的复制情况 | 第52页 |
| 3.5 重组病毒在小鼠脏器的分布情况 | 第52页 |
| 3.6 重组病毒免疫中和抗体表达测定 | 第52-53页 |
| 3.7 重组病毒免疫孕保护效果评价 | 第53页 |
| 4 结果 | 第53-59页 |
| 4.1 重组病毒和亲本株在不同细胞系中的生长特征测定 | 第53-54页 |
| 4.2 转染mi RNA mimics后对重组病毒复制的影响 | 第54-55页 |
| 4.3 重组病毒在BALB/c乳鼠颅内的复制情况评价 | 第55-56页 |
| 4.4 重组病毒在A129成鼠脏器的分布情况 | 第56-57页 |
| 4.5 重组病毒免疫BALB/c成鼠中和抗体表达情况 | 第57页 |
| 4.6 重组病毒成鼠体内免疫保护效果评价 | 第57-58页 |
| 4.7 重组病毒免疫孕鼠的保护效果评价 | 第58-59页 |
| 5 讨论 | 第59-61页 |
| 总结 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-66页 |
| 附录A 个人简历 | 第66-67页 |
| 附录B 主要试剂、溶液配制 | 第67-70页 |
| 附录C 硕士期间参与撰写的论著 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-73页 |
| 综述 MicroRNA靶向性调控策略在减毒活疫苗中的研究进展 | 第73-83页 |
| 参考文献 | 第81-83页 |
