| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| Contents | 第10-13页 |
| 主要縮略语表 | 第13-14页 |
| 第1章 引言 | 第14-23页 |
| 1.1 黄连素的抗肿瘤研究 | 第15-18页 |
| 1.1.1 抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡 | 第15-16页 |
| 1.1.2 抑制细胞侵袭和转移 | 第16-18页 |
| 1.2 凋亡相关蛋白 | 第18-22页 |
| 1.2.1 Bcl-2家族蛋白 | 第19-20页 |
| 1.2.2 线粒体释放蛋白与Caspases | 第20-21页 |
| 1.2.3 凋亡相关信号通路中的关键蛋白 | 第21-22页 |
| 1.3 本课题研究的目标、内容与意义 | 第22-23页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第23-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-29页 |
| 2.1.1 细胞系和裸鼠 | 第23页 |
| 2.1.2 工具酶和抗体 | 第23-24页 |
| 2.1.3 主要化学试剂和耗材 | 第24-25页 |
| 2.1.4 细胞培养试剂 | 第25页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第25-27页 |
| 2.1.6 主要溶液配制 | 第27-29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-38页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第29-30页 |
| 2.2.2 细胞增殖存活率测定(MTT法) | 第30页 |
| 2.2.3 细胞凋亡的形态学观察(Hoechst33342染色) | 第30-31页 |
| 2.2.4 细胞凋亡率检测(Annexin-V/PI双染法) | 第31页 |
| 2.2.5 线粒体膜电位检测 | 第31-32页 |
| 2.2.6 细胞全蛋白抽提 | 第32页 |
| 2.2.7 分离抽提细胞核与细胞浆蛋白 | 第32-33页 |
| 2.2.8 线粒体蛋白提取 | 第33页 |
| 2.2.9 蛋白浓度检测(BCA法) | 第33-34页 |
| 2.2.10 Western Blot | 第34页 |
| 2.2.11 裸鼠皮下成瘤实验 | 第34-35页 |
| 2.2.12 细胞划痕实验 | 第35页 |
| 2.2.13 细菌感受态的制作 | 第35页 |
| 2.2.14 质粒转化 | 第35-36页 |
| 2.2.15 质粒中提 | 第36页 |
| 2.2.16 细胞转染 | 第36-37页 |
| 2.2.17 免疫荧光 | 第37页 |
| 2.2.18 数据处理 | 第37-38页 |
| 第3章 结果与讨论 | 第38-58页 |
| 3.1 凋亡相关结果 | 第38-47页 |
| 3.1.1 黄连素对人结肠癌细胞增殖存活率的影响 | 第38-39页 |
| 3.1.2 黄连素诱导人结肠癌细胞凋亡 | 第39-43页 |
| 3.1.3 黄连素诱导人结肠癌细胞凋亡的分子机制 | 第43-46页 |
| 3.1.4 黄连素对人结肠癌细胞增殖生长影响的体内研究 | 第46-47页 |
| 3.2 迁移相关结果 | 第47-50页 |
| 3.2.1 黄连素对人结肠癌细胞迁移能力的影响 | 第47-48页 |
| 3.2.2 黄连素对人结肠癌细胞迁移相关蛋白的影响 | 第48-49页 |
| 3.2.3 黄连素对Exo70定位的影响 | 第49-50页 |
| 3.3 讨论 | 第50-58页 |
| 3.3.1 黄连素对人结肠癌细胞的存活抑制作用 | 第51页 |
| 3.3.2 黄连素诱导人结肠癌细胞凋亡作用 | 第51-53页 |
| 3.3.3 黄连素诱导人结肠癌细胞凋亡的分子机制 | 第53-55页 |
| 3.3.4 黄连素对人结肠癌细胞增殖抑制作用的体内研究 | 第55页 |
| 3.3.5 黄连素抑制人结肠癌细胞迁移作用 | 第55-56页 |
| 3.3.6 黄连素对Exo70定位的影响 | 第56-58页 |
| 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
