| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 前言 | 第10-20页 |
| 1.1 酯酶 | 第10-11页 |
| 1.1.1 酯酶简介 | 第10-11页 |
| 1.1.2 酯酶的来源 | 第11页 |
| 1.2 酯酶分类 | 第11-15页 |
| 1.2.1 酯酶分类 | 第11-13页 |
| 1.2.2 脂肪酶 | 第13-14页 |
| 1.2.3 酯酶与脂肪酶的区别 | 第14-15页 |
| 1.3 酯酶的催化反应及其应用 | 第15-19页 |
| 1.3.1 酯酶的催化反应 | 第15-17页 |
| 1.3.2 酯酶的应用 | 第17-19页 |
| 1.4 研究背景及实验思路 | 第19-20页 |
| 第2章 Esterase/Lipase 的筛选与表达 | 第20-32页 |
| 2.1 引言 | 第20页 |
| 2.2 实验材料与仪器 | 第20-22页 |
| 2.2.1 材料 | 第20-21页 |
| 2.2.2 仪器 | 第21页 |
| 2.2.3 其他 | 第21-22页 |
| 2.3 实验方法 | 第22-25页 |
| 2.3.1 Alcanivorax borkumensis SK2 基因组的提取 | 第22页 |
| 2.3.2 重组质粒的构建 | 第22-24页 |
| 2.3.3 目的蛋白的表达 | 第24页 |
| 2.3.4 酯酶活性测定 | 第24-25页 |
| 2.4 结果与结论 | 第25-31页 |
| 2.4.1 Alcanivorax borkumensis SK2 中疑似 Esterase/Lipase 基因序列的重组质粒构建 | 第25-28页 |
| 2.4.2 Thermomonospora curvata DSM 43183 中疑似 Esterase/Lipase 基因序列的重组质粒构建 | 第28-29页 |
| 2.4.3 Thermotoga naphthophila RUK-10 中疑似 Esterase/Lipase 基因序列的重组质粒构建 | 第29-31页 |
| 2.5 小结 | 第31-32页 |
| 第3章 酯酶的表达优化和蛋白纯化 | 第32-38页 |
| 3.1 引言 | 第32页 |
| 3.2 实验方法 | 第32-33页 |
| 3.2.1 目的蛋白的表达优化 | 第32-33页 |
| 3.2.2 目的蛋白的纯化 | 第33页 |
| 3.3 结果与结论 | 第33-36页 |
| 3.3.1 酯酶表达优化结果 | 第33-36页 |
| 3.3.2 嗜热酯酶 Tnap-0664 的纯化结果 | 第36页 |
| 3.4 小结 | 第36-38页 |
| 第4章 嗜热酯酶 Tnap-0664 的酶学性质表征 | 第38-48页 |
| 4.1 引言 | 第38页 |
| 4.2 实验方法 | 第38-40页 |
| 4.2.1 蛋白纯化及回收率和纯化倍数计算 | 第38页 |
| 4.2.2 底物特异性 | 第38-39页 |
| 4.2.3 温度对酯酶活性的影响 | 第39页 |
| 4.2.4 pH 对酯酶活性的影响 | 第39页 |
| 4.2.5 稳定性测定 | 第39-40页 |
| 4.2.6 动力学常数测定 | 第40页 |
| 4.2.7 非变性电泳 | 第40页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第40-46页 |
| 4.3.1 蛋白纯化及回收率和纯化倍数计算 | 第40-41页 |
| 4.3.2 底物特异性 | 第41-42页 |
| 4.3.3 温度对酯酶活性的影响 | 第42-43页 |
| 4.3.4 pH 对酯酶活性的影响 | 第43-44页 |
| 4.3.5 稳定性测定 | 第44-45页 |
| 4.3.6 动力学常数测定 | 第45-46页 |
| 4.3.7 非变性电泳 | 第46页 |
| 4.4 小结 | 第46-48页 |
| 全文总结 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-57页 |
| 硕士期间发表的文章 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
