| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 前言 | 第7-15页 |
| ·TNF受体生物学功能及其相关的重组蛋白药物 | 第7-11页 |
| ·HSA融合技术在开发长效融合蛋白药物中的应用 | 第11-12页 |
| ·立题背景及研究内容 | 第12-15页 |
| 2 材料和方法 | 第15-27页 |
| ·材料 | 第15-18页 |
| ·菌株 | 第15页 |
| ·细胞株 | 第15页 |
| ·质粒 | 第15-16页 |
| ·引物 | 第16页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第16-17页 |
| ·培养基和常用溶液 | 第17页 |
| ·主要实验仪器 | 第17-18页 |
| ·方法 | 第18-27页 |
| ·分子克隆实验技术 | 第18-21页 |
| ·酵母工程菌的筛选与蛋白表达 | 第21-23页 |
| ·蛋白表达产物的纯化 | 第23-24页 |
| ·细胞培养和蛋白活性检测 | 第24-27页 |
| 3 结果 | 第27-43页 |
| ·重组融合蛋白表达质粒的构建 | 第27-32页 |
| ·重组融合蛋白HSA-GS-sTNFR1和sTNFR1-HSA的表达及检测 | 第32-34页 |
| ·酵母转化子的PCR鉴定 | 第32-33页 |
| ·重组融合蛋白HSA-GS-sTNFR1和sTNFR1-HSA在酵母中的表达与高拷贝菌株的筛选 | 第33-34页 |
| ·重组融合蛋白HSA-GS-sTNFR1和sTNFR1-HSA的纯化 | 第34-39页 |
| ·阳离子交换柱层析 | 第34-35页 |
| ·凝胶层析(分子筛) | 第35-37页 |
| ·蛋白纯度及纯化回收率分析 | 第37-39页 |
| ·重组融合蛋白HSA-GS-sTNFR1和sTNFR1-HSA拮抗TNF α的活性 | 第39-43页 |
| 4 讨论 | 第43-47页 |
| 5 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 文献综述 | 第54-59页 |
| 参考文献 | 第58-59页 |
| 附录 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
