| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 第一章 无脊椎动物的先天性免疫 | 第11-28页 |
| 一、无脊椎动物的先天性免疫概述 | 第11-20页 |
| 1. 物理防御 | 第11页 |
| 2. 体液免疫 | 第11-14页 |
| 2.1 抗菌肽 | 第11-12页 |
| 2.2 血淋巴凝集 | 第12-13页 |
| 2.3 酚氧化酶原系统的激活 | 第13-14页 |
| 3. 细胞免疫 | 第14页 |
| 3.1 吞噬作用 | 第14页 |
| 3.2 包囊作用 | 第14页 |
| 3.3 结节形成 | 第14页 |
| 4. 模式识别受体 | 第14-16页 |
| 5. 日本囊对虾的常见病原 | 第16-20页 |
| 5.1 白斑综合征病毒 | 第16-19页 |
| 5.2 鳗弧菌 | 第19-20页 |
| 二、P-型凝集素概述 | 第20-26页 |
| 1. 凝集素概述 | 第20-22页 |
| 1.1 凝集素 | 第20-21页 |
| 1.2 对虾凝集素 | 第21-22页 |
| 2. P-型凝集素基本结构与功能概述 | 第22-26页 |
| 2.1 P-型凝集素基本结构 | 第23-24页 |
| 2.2 P-型凝集素功能 | 第24-26页 |
| 3. P-型凝集素免疫研究进展 | 第26页 |
| 三、本研究的科学问题及意义 | 第26-28页 |
| 第二章 阳离子依赖的6-磷酸甘露糖受体CD-MPR作为受体帮助WSSV进入细胞 | 第28-51页 |
| 一、前言 | 第28-29页 |
| 二、材料与方法 | 第29-36页 |
| 1. 试剂、仪器、菌株、载体 | 第29页 |
| 2. WSSV免疫刺激 | 第29页 |
| 3. RNA和组织蛋白的提取 | 第29-30页 |
| 4. 反转录cDNA | 第30页 |
| 5. RT-PCR和qRT-PCR | 第30-31页 |
| 6. MjCD-MPR胞外结构域的重组表达与蛋白纯化以及抗体制备 | 第31-32页 |
| 7. SDS-PAGE | 第32页 |
| 8. Western Blot | 第32-33页 |
| 9. RNA干扰和过表达 | 第33页 |
| 10. 抗体封闭实验 | 第33-34页 |
| 11. 重组蛋白的pull-down实验 | 第34页 |
| 12. 免疫细胞化学 | 第34页 |
| 13. WSSV与MjCD-MPR的共定位 | 第34-36页 |
| 三、实验结果 | 第36-50页 |
| 1. MjCD-MPR全长的基因克隆与分析 | 第36-38页 |
| 2. MjCD-MPR胞外结构域的表达纯化与抗体制备 | 第38-40页 |
| 3. MjCD-MPR的组织分布与病毒刺激的表达模式 | 第40-42页 |
| 4. 干扰MjCD-MPR,WSSV ie1与vp28的表达量下降 | 第42页 |
| 5. MjCD-MPR抗体能够封闭MjCD-MPR促进病毒复制的功能 | 第42-44页 |
| 6. MjCD-MPR胞外结构域可与WSS三种囊膜蛋白VP19、VP24、VP26结合 | 第44-46页 |
| 7. 过表达MjCD-MPR,WSSV ie1与vp28的表达量上升 | 第46页 |
| 8. WSSV刺激后MjCD-MPR的亚细胞定位发生变化 | 第46-49页 |
| 9. MjCD-MPR与WSSV共定位 | 第49-50页 |
| 四、讨论 | 第50-51页 |
| 第三章 阳离子依赖的6-磷酸甘露糖受体CD-MPR抗细菌免疫的功能研究 | 第51-59页 |
| 一、前言 | 第51-52页 |
| 二、材料和方法 | 第52-53页 |
| 1. 试剂、仪器、菌株、载体 | 第52页 |
| 2. 弧菌免疫刺激 | 第52页 |
| 3. RNA提取与反转录cDNA | 第52页 |
| 4. 实时定量RT-PCR(qRT-PCR)和Western Blot | 第52页 |
| 5. 细菌结合实验 | 第52-53页 |
| 6. 糖结合试验 | 第53页 |
| 7. 弧菌清除实验 | 第53页 |
| 8. 细菌生长抑制实验 | 第53页 |
| 9. 抗菌肽基因的表达水平检测 | 第53页 |
| 三、结果 | 第53-57页 |
| 1. MjCD-MPR弧菌刺激表达模式 | 第53-54页 |
| 2. MjCD-MPR促进弧菌清除 | 第54-55页 |
| 3. MjCD-MPR与多种革兰氏阳性菌和阴性菌结合 | 第55页 |
| 4. MjCD-MPR与LPS、LTA、PG三种多糖结合 | 第55-56页 |
| 5. MjCD-MPR对于细菌没有直接的生长抑制作用 | 第56-57页 |
| 6. MjCD-MPR通过调控抗菌肽的表达量发挥抑菌功能 | 第57页 |
| 四、讨论 | 第57-59页 |
| 创新点总结 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 附件 | 第67页 |
