| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-23页 |
| 1.1 泰国伯克霍尔德氏菌简介 | 第11页 |
| 1.2 细菌抗氧化机制研究 | 第11-15页 |
| 1.2.1 活性氧(ROS) | 第11-13页 |
| 1.2.2 氧化应激调控因子 | 第13-15页 |
| 1.3 细菌自由基清除机制 | 第15-21页 |
| 1.3.1 活性氧自由基 | 第15-16页 |
| 1.3.2 抗氧化酶系与小分子抗氧化剂 | 第16-21页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第21-22页 |
| 1.5 技术路线 | 第22-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-35页 |
| 2.1 菌株质粒和引物 | 第23-26页 |
| 2.2 试剂 | 第26-27页 |
| 2.2.1 培养基 | 第26页 |
| 2.2.2 分子生物学试剂 | 第26页 |
| 2.2.3 生化试剂 | 第26-27页 |
| 2.3 实验方法 | 第27-35页 |
| 2.3.1 质粒提取 | 第27页 |
| 2.3.2 克隆构建 | 第27-28页 |
| 2.3.3 DNA片段回收 | 第28页 |
| 2.3.4 DNA片段酶切及连接 | 第28-29页 |
| 2.3.5 热激感受态的制备及化学转化 | 第29页 |
| 2.3.6 构建突变体及回复株 | 第29-30页 |
| 2.3.7 细胞总RNA提取 | 第30-31页 |
| 2.3.8 凝胶阻滞迁移实验(EMSA) | 第31-32页 |
| 2.3.9 胞内ROS检测 | 第32页 |
| 2.3.10 不同胁迫条件下存活率实验 | 第32-33页 |
| 2.3.11 蛋白的表达与纯化 | 第33页 |
| 2.3.12 催化动力学测定 | 第33页 |
| 2.3.13 亚硫酸和二硫键生成分析 | 第33-34页 |
| 2.3.14 亚磺酸与二硫键的分析 | 第34-35页 |
| 第三章 实验结果 | 第35-43页 |
| 3.1 OxyR对伯克霍尔德氏ahpC的调控作用 | 第35-37页 |
| 3.1.1 OxyR负调控ahpC的表达 | 第35页 |
| 3.1.2 OxyR直接调控ahpC | 第35-37页 |
| 3.2 AhpC在氧胁迫条件下的作用 | 第37-38页 |
| 3.3 AhpD作为AhpC的电子供体 | 第38-39页 |
| 3.4 Cys57和Cys171、Cys173分别为过氧化半胱氨酸残基(C_P)和再生Cys残基(C_R) | 第39-40页 |
| 3.5 AhpC点突变体酶活性测定 | 第40-43页 |
| 第四章 分析与讨论 | 第43-45页 |
| 第五章 结论 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
| 附录 | 第51-71页 |
| 致谢 | 第71-73页 |
| 作者简介 | 第73页 |