| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 引言 | 第8-21页 |
| 一、乳腺癌概述 | 第8-11页 |
| (一) 乳腺癌现状 | 第8-9页 |
| (二) 乳腺癌的分子分型 | 第9-10页 |
| (三) 乳腺癌的治疗 | 第10-11页 |
| (四) 乳腺癌治疗中的问题 | 第11页 |
| 二、表皮生长因子受体 | 第11-16页 |
| (一) EGFR信号转导 | 第11-13页 |
| (二) EGFR抑制剂 | 第13-15页 |
| (三) EGFR抑制剂的耐药机制 | 第15-16页 |
| 三、AnnexinA2与EGFR | 第16-20页 |
| (一) AnnexinA2 | 第16-19页 |
| (二) EGFR与AnnexinA | 第19-20页 |
| 四、本论文研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 实验材料与方法 | 第21-32页 |
| 一、实验材料 | 第21-24页 |
| (一) 细胞 | 第21页 |
| (二) 抗体 | 第21页 |
| (三) 试剂 | 第21-22页 |
| (四) 主要仪器和设备 | 第22页 |
| (五) 主要溶液配制 | 第22-24页 |
| 二、实验方法 | 第24-32页 |
| (一) 细胞培养 | 第24页 |
| (二) 细胞总蛋白提取 | 第24页 |
| (三) SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第24页 |
| (四) Western-blot | 第24-25页 |
| (五) 流式细胞仪分析 | 第25页 |
| (六) 免疫荧光 | 第25-26页 |
| (七) 细胞计数 | 第26页 |
| (八) MTS实验 | 第26页 |
| (九) AnnexinA2过表达质粒的构建 | 第26-30页 |
| (十) 稳定高表达AnnexinA2以及AnnexinA2突变体细胞模型的构建 | 第30-31页 |
| (十一) 统计学方法 | 第31-32页 |
| 实验结果与分析 | 第32-46页 |
| 一、MCF-7与MDA-MB-231细胞ER、PR、HER-2表达情况分析 | 第32页 |
| 二、EGFR在三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞中大量表达 | 第32-34页 |
| 三、MDA-MB-231细胞对EGFR酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼不敏感 | 第34-35页 |
| 四、下调AnnexinA2使MDA-MB-231细胞对吉非替尼的敏感性增强 | 第35-37页 |
| 五、上调AnnexinA2使MCF-7细胞对吉非替尼的敏感性降低 | 第37-41页 |
| (一) 质粒构建 | 第37-39页 |
| (二) AnnexinA2表达上调后MCF-7细胞对吉非替尼的敏感性降低 | 第39-41页 |
| 六、AnnexinA2第23位酪氨酸磷酸化使乳腺癌细胞对吉非替尼的敏感性降低 | 第41-44页 |
| 七、AnnexinA2高表达及其第23位酪氨酸磷酸化影响乳腺癌细胞的增殖 | 第44-46页 |
| 讨论 | 第46-49页 |
| 主要结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
