缩略语表 | 第6-7页 |
中文摘要 | 第7-10页 |
英文摘要 | 第10-13页 |
前言 | 第14-15页 |
文献回顾 | 第15-20页 |
实验一 Sp1磷酸化参与CD147基因表达调控 | 第20-40页 |
1 材料 | 第20-22页 |
1.1 主要仪器 | 第20-21页 |
1.2 细胞系和细胞株 | 第21页 |
1.3 质粒 | 第21页 |
1.4 主要试剂 | 第21-22页 |
1.5 主要缓冲液 | 第22页 |
2 方法 | 第22-32页 |
2.1 细胞培养 | 第22页 |
2.2 实验所需载体的扩增及保存 | 第22-24页 |
2.3 构建Sp1磷酸化位点突变体 | 第24-26页 |
2.4 双荧光素酶报告系统实验检测Sp1磷酸化对CD147的调控作用 | 第26-27页 |
2.5 RT-PCR检测Sp1磷酸化对CD147表达水平的影响 | 第27-30页 |
2.6 Western blot检测Sp1磷酸化对CD147表达水平的影响[98] | 第30-32页 |
2.7 数据的统计分析 | 第32页 |
3 结果 | 第32-38页 |
3.1 构建Sp1磷酸化位点突变体 | 第32页 |
3.2 促进CD147表达的Sp1磷酸化位点的确定 | 第32-38页 |
4 讨论 | 第38-40页 |
实验二 CD147通过激活MAPK/ERK/mTOR和PI3K/AKT磷酸化通路促进Sp1磷酸化 | 第40-50页 |
1 材料 | 第40-41页 |
1.1 主要仪器 | 第40页 |
1.2 细胞系和细胞株 | 第40页 |
1.3 主要试剂 | 第40-41页 |
1.4 主要缓冲液 | 第41页 |
2 方法 | 第41-43页 |
2.1 Western blot检测磷酸化通路抑制剂阻滞后Sp1磷酸化和CD147表达 | 第41-42页 |
2.2 瞬时转染 | 第42页 |
2.3 CD147干涉 | 第42页 |
2.4 Western blot检测CD147对Sp1磷酸化表达的影响[98] | 第42页 |
2.5 数据的统计分析 | 第42-43页 |
3 结果 | 第43-48页 |
3.1 MAPK/ERK和PI3K/AKT/mTOR磷酸化通路抑制剂下调Sp1磷酸化和CD147的蛋白表达 | 第43页 |
3.2 上调CD147促进Sp1磷酸化表达 | 第43页 |
3.3 干扰CD147抑制Sp1磷酸化表达 | 第43-44页 |
3.4 CD147-Sp1关系环 | 第44-48页 |
4 讨论 | 第48-50页 |
实验三 CD147-Sp1关系环对卵巢癌细胞侵袭性的影响 | 第50-54页 |
1 材料 | 第50页 |
1.1 主要仪器 | 第50页 |
1.2 细胞系和细胞株 | 第50页 |
1.3 主要试剂 | 第50页 |
2 方法 | 第50-51页 |
2.1 Transwell实验检测CD147-Sp1关系环对卵巢癌细胞侵袭性的影响[13] | 第50-51页 |
2.2 数据的统计分析[13] | 第51页 |
3 结果 | 第51-53页 |
3.1 CD147抗体封闭显著降低HO-8910PM的侵袭能力 | 第51-52页 |
3.2 Sp1磷酸化抗体封闭显著降低HO-8910PM的侵袭能力 | 第52页 |
3.3 CD147和Sp1磷酸化抗体联合封闭显著降低HO-8910PM的侵袭能力 | 第52-53页 |
4 讨论 | 第53-54页 |
实验四 CD147与Sp1磷酸化在卵巢癌中的表达相关性 | 第54-62页 |
1 材料 | 第54-56页 |
1.1 主要仪器 | 第54页 |
1.2 细胞系和细胞株 | 第54页 |
1.3 病理标本 | 第54-55页 |
1.4 主要试剂 | 第55页 |
1.5 主要缓冲液 | 第55-56页 |
2 方法 | 第56-57页 |
2.1 细胞培养 | 第56页 |
2.2 Western blot检测卵巢癌细胞Sp1磷酸化和CD147蛋白表达 | 第56页 |
2.3 免疫组化检测CD147与Sp1磷酸化在卵巢癌组织中的表达 | 第56-57页 |
2.4 数据的统计分析 | 第57页 |
3 结果 | 第57-61页 |
3.1 CD147与Sp1磷酸化在卵巢癌细胞系中的表达正相关 | 第57页 |
3.2 CD147与Sp1磷酸化在卵巢癌组织中的表达具有相关性 | 第57-61页 |
4 讨论 | 第61-62页 |
小结 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-75页 |
个人简历和研究成果 | 第75-77页 |
致谢 | 第77-78页 |