摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
第一章 研究背景及文献综述 | 第10-31页 |
1.1 基因表达基本概念 | 第10-13页 |
1.1.1 基因表达的概念 | 第10页 |
1.1.2 基因表达调控的生物学意义 | 第10-11页 |
1.1.3 基因表达的规律 | 第11-12页 |
1.1.4 基因表达的方式 | 第12-13页 |
1.2 转录调控 | 第13-19页 |
1.2.1 转录调控基本过程 | 第13页 |
1.2.2 原核基因转录调控 | 第13-15页 |
1.2.3 真核基因转录调控 | 第15-18页 |
1.2.4 真核RNA的转录后加工 | 第18-19页 |
1.3 细胞分化 | 第19-27页 |
1.4 信号转导 | 第27-28页 |
1.5 ASB家族基因与肌肉的发生和分化 | 第28-29页 |
1.6 本课题研究的意义 | 第29-31页 |
第二章 人类心脏发育候选基因ASB11的功能分析 | 第31-49页 |
2.1 材料 | 第31-34页 |
2.1.1 生物信息学软件 | 第31-32页 |
2.1.2 主要试剂 | 第32-33页 |
2.1.3 细胞、菌株和质粒 | 第33-34页 |
2.2 实验方法 | 第34-45页 |
2.2.1 总RNA的抽提 | 第34-35页 |
2.2.2 引物设计与合成 | 第35页 |
2.2.3 PCR扩增 | 第35-36页 |
2.2.4 PCR产物纯化回收 | 第36-37页 |
2.2.5 载体连接实验 | 第37页 |
2.2.6 感受态细胞的制备 | 第37-38页 |
2.2.7 连接产物的转化 | 第38页 |
2.2.8 质粒的小量制备 | 第38-39页 |
2.2.9 阳性克隆的筛选与鉴定 | 第39-40页 |
2.2.10 测序 | 第40页 |
2.2.11 真核表达重组质粒的大量制备 | 第40-41页 |
2.2.12 细胞培养 | 第41-43页 |
2.2.13 Western blot | 第43-44页 |
2.2.14 荧光免疫检测法 | 第44页 |
2.2.15 荧光素酶报告系统分析 | 第44-45页 |
2.2.16 统计学分析 | 第45页 |
2.3 本文所用质粒构建流程图 | 第45-49页 |
第三章 实验结果及分析 | 第49-67页 |
3.1 ASB11基因的生物信息学分析 | 第49-58页 |
3.1.1 ASB11基因计算机克隆 | 第49页 |
3.1.2 ASB1l蛋白质产物 | 第49-55页 |
3.1.3 ASB11与同源基因的编码蛋白的同源性比较及进化分析 | 第55-57页 |
3.1.4 人ASB基因家族保守性比较 | 第57-58页 |
3.2 ASB11基因ORF的克隆 | 第58页 |
3.3 ASB11的组织表达及ASB11蛋白的亚细胞定位 | 第58-59页 |
3.3.1 人类ASB11的Norternblot分析 | 第58-59页 |
3.3.2 ASB11蛋白的亚细胞定位 | 第59页 |
3.4 ASB11对C2C12小鼠骨骼肌分化的影响 | 第59-65页 |
3.4.1 ASB11的mRNA和蛋白质水平在肌原分化过程中持续上调 | 第59-61页 |
3.4.2 ASB11抑制C2C12细胞分化进程 | 第61-65页 |
3.5 ASB11参与肌肉分化过程的信号转导机制研究 | 第65-67页 |
第四章 讨论 | 第67-70页 |
第五章 结语 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-86页 |
英文缩写词简表 | 第86-88页 |
附录: 攻读学位期间的学术论文 | 第88-89页 |
致谢 | 第89-90页 |