| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第一章 综述 | 第15-23页 |
| 1.1 背景 | 第15页 |
| 1.2 结肠癌的分类 | 第15-16页 |
| 1.3 CRC 发生的分子机制 | 第16页 |
| 1.4 SOCS3 及其家族 | 第16-18页 |
| 1.4.1 SOCS 家族 | 第16-17页 |
| 1.4.2 SOCS3 基因的选择 | 第17-18页 |
| 1.5 JAK/STAT 信号通路的研究 | 第18页 |
| 1.6 SOCS3 与JAK/STAT 信号通路的研究 | 第18-19页 |
| 1.7 JAK/STAT 信号通路与结肠癌 | 第19页 |
| 1.8 溶瘤腺病毒 | 第19-21页 |
| 1.8.1 腺病毒的研究现状 | 第19-20页 |
| 1.8.2 溶瘤腺病毒作用机理 | 第20-21页 |
| 1.8.3 携带SOCS3 溶瘤腺病毒 | 第21页 |
| 1.9 本研究课题的来源和主要创新点 | 第21-22页 |
| 1.9.1 课题的来源 | 第21页 |
| 1.9.2 课题创新点 | 第21-22页 |
| 1.10 课题流程示意图 | 第22-23页 |
| 第二章：实验材料及仪器 | 第23-28页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 病毒株 | 第23页 |
| 2.1.2 细胞株 | 第23页 |
| 2.1.3 实验动物 | 第23-24页 |
| 2.1.4 实验耗材 | 第24-25页 |
| 2.2 实验仪器 | 第25-26页 |
| 2.3 实验试剂 | 第26-28页 |
| 2.3.1 细胞培养液相关试剂 | 第26页 |
| 2.3.2 蛋白电泳相关试剂 | 第26-28页 |
| 第三章 实验方法 | 第28-39页 |
| 3.1 小剂量扩增病毒及病毒鉴定鉴定 | 第28-29页 |
| 3.1.1 HEK293 细胞计数、铺板及病毒感染 | 第28页 |
| 3.1.2 病毒DNA 抽提 | 第28页 |
| 3.1.3 PCR 鉴定病毒基因组 | 第28-29页 |
| 3.2 病毒大量扩增、病毒纯化以及病毒滴度测定 | 第29-31页 |
| 3.2.1 病毒大量扩增 | 第29页 |
| 3.2.2 病毒收集 | 第29页 |
| 3.2.3 病毒纯化 | 第29-30页 |
| 3.2.4 病毒的滴定（TCID50 法） | 第30-31页 |
| 3.3 目的病毒在不同细胞中复制能力的测定 | 第31页 |
| 3.4 体外实验研究 | 第31-33页 |
| 3.4.1 MTT 细胞杀伤试验检测病毒对细胞的杀伤作用 | 第31页 |
| 3.4.2 结肠癌细胞系中SOCS3 以及STAT3 信号通路相关蛋白的检测 | 第31-33页 |
| 3.4.2.1 结肠癌细胞总蛋白样品的收集 | 第31页 |
| 3.4.2.2 瘤组织和肠组织中总蛋白样品的收集 | 第31-32页 |
| 3.4.2.3 总蛋白定量（BCA 法） | 第32页 |
| 3.4.2.4 Western-blot 检测相关蛋白表达 | 第32-33页 |
| 3.5 STAT3 信号通路相关癌基因m RNA 的检测 | 第33-35页 |
| 3.5.1 结肠癌细胞总RNA 的提取 | 第33页 |
| 3.5.2 cDNA 的合成 | 第33-34页 |
| 3.5.3 肿瘤及大肠组织中总m RNA 的抽提 | 第34页 |
| 3.5.4 qRT-PCR 定量癌症相关基因m RNA 丰度 | 第34-35页 |
| 3.6 SOCS3 诱导肿瘤细胞凋亡 | 第35-36页 |
| 3.6.1 细胞的计数及铺板 | 第35页 |
| 3.6.2 HT-29 细胞的Hoechst 染色 | 第35-36页 |
| 3.7 携带SOCS3 的溶瘤腺病毒在结肠癌移植瘤内实验研究 | 第36-39页 |
| 3.7.1 裸鼠结肠癌移植瘤的成瘤 | 第36-37页 |
| 3.7.1.1 裸鼠的准备 | 第36页 |
| 3.7.1.2 SW620 细胞的准备 | 第36页 |
| 3.7.1.3 皮下注射SW620 细胞成瘤 | 第36页 |
| 3.7.1.4 裸鼠分组及病毒注射 | 第36-37页 |
| 3.7.2 肿瘤大小测量，监测病毒疗效 | 第37页 |
| 3.7.3 移植瘤组织标本取材 | 第37页 |
| 3.7.4 免疫组化检测肿瘤组织中STAT3、p-STAT3、Bcl-2 和Bcl-x1 | 第37页 |
| 3.7.5 肿瘤组织H&E 染色分析 | 第37-39页 |
| 第四章 结果与分析 | 第39-50页 |
| 4.1 AdCN305-cppSOCS3 病毒鉴定 | 第39页 |
| 4.2 目的病毒在不同细胞中的复制能力 | 第39-40页 |
| 4.3 MTT 细胞杀伤试验检测病毒对细胞的杀伤作用 | 第40-41页 |
| 4.4 SOCS3 蛋白在结肠癌细胞中本底表达 | 第41-42页 |
| 4.5 STAT3 蛋白在结肠癌细胞中的磷酸化水平 | 第42-43页 |
| 4.6 注射病毒后移植瘤内SOCS3 蛋白的表达 | 第43页 |
| 4.7 SOCS3 蛋白对STAT3 磷酸化及下游效应因子表达的抑制 | 第43-46页 |
| 4.7.1 肿瘤组织和正常组织中STAT3 下游效应基因的m RNA 检测 | 第43-45页 |
| 4.7.2 结肠癌细胞中STAT3 下游效应基因的m RNA 检测 | 第45-46页 |
| 4.8 SOCS3 诱导肿瘤细胞凋亡 | 第46-47页 |
| 4.9 目的病毒表结肠癌移植瘤移植瘤体内实验研究 | 第47-48页 |
| 4.10 移植瘤组织免疫组化和 H&E 染色 | 第48-50页 |
| 第五章 讨论与结论 | 第50-53页 |
| 5.1 讨论 | 第50-52页 |
| 5.2 结论 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 硕士期间发表论文 | 第60页 |
