| 摘要 | 第3-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 前言 | 第17-23页 |
| 第一章 CK2α在大肠腺瘤组织、大肠癌组织和细胞中的表达及其与患者临床病理参数的关系 | 第23-44页 |
| 1 材料与方法 | 第23-32页 |
| 1.1 细胞系 | 第23页 |
| 1.2 临床标本采集 | 第23-24页 |
| 1.3 主要试剂 | 第24-25页 |
| 1.4 主要仪器 | 第25页 |
| 1.5 主要溶液配制 | 第25-28页 |
| 1.6 细胞培养 | 第28页 |
| 1.7 蛋白提取 | 第28页 |
| 1.8 改良Bradford法测量蛋白浓度 | 第28-30页 |
| 1.9 免疫印迹 | 第30-32页 |
| 1.10 免疫组化方法检测CK2α表达及结果判断 | 第32页 |
| 1.11 数据分析及统计方法 | 第32页 |
| 2 结果 | 第32-38页 |
| 2.1 CK2α在5种不同大肠癌细胞株中的表达 | 第32-33页 |
| 2.2 CK2α在8对不同大肠癌组织及其癌旁正常大肠粘膜组织中的表达 | 第33页 |
| 2.3 免疫组化方法检测CK2α在正常大肠粘膜、大肠腺瘤和大肠癌组织中的表达 | 第33-36页 |
| 2.4 CK2α的表达与大肠癌患者临床病理参数的关系 | 第36-38页 |
| 3 讨论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-44页 |
| 第二章 沉默CK2α的表达对大肠癌癌细胞生物学特性的影响 | 第44-62页 |
| 1 材料与方法 | 第44-47页 |
| 1.1 细胞 | 第44页 |
| 1.2 主要试剂 | 第44-45页 |
| 1.3 主要仪器 | 第45页 |
| 1.4 细胞培养 | 第45页 |
| 1.5 干扰片段的设计及合成 | 第45页 |
| 1.6 细胞转染 | 第45页 |
| 1.7 免疫印迹 | 第45-46页 |
| 1.8 噻唑蓝(MTT)比色实验检测细胞增殖能力 | 第46页 |
| 1.9 平板克隆形成实验 | 第46页 |
| 1.10 β-半乳糖苷酶染色实验检测细胞衰老 | 第46-47页 |
| 1.11 细胞周期检测 | 第47页 |
| 1.12 细胞划痕实验 | 第47页 |
| 1.13 体外侵袭实验 | 第47页 |
| 1.14 统计学分析 | 第47页 |
| 2 结果 | 第47-56页 |
| 2.1 免疫印迹方法检测CK2α基因的干扰效率 | 第47-48页 |
| 2.2 CK2α下调对细胞增殖能力的影响 | 第48-49页 |
| 2.3 CK2α下调对细胞克隆形成能力的影响 | 第49-50页 |
| 2.4 CK2α下调对细胞衰老的影响 | 第50-51页 |
| 2.5 CK2α下调对细胞周期的影响 | 第51-53页 |
| 2.6 CK2α下调对细胞迁移能力的影响 | 第53-55页 |
| 2.7 CK2α下调对细胞侵袭能力的影响 | 第55-56页 |
| 3 讨论 | 第56-59页 |
| 参考文献 | 第59-62页 |
| 第三章 CK2α调控大肠癌发生及发展分子机制的初步探讨 | 第62-72页 |
| 1 材料与方法 | 第62-64页 |
| 1.1 细胞 | 第62页 |
| 1.2 主要试剂 | 第62-63页 |
| 1.3 主要仪器 | 第63页 |
| 1.4 表皮生长因子(EGF)刺激细胞生长 | 第63页 |
| 1.5 免疫荧光 | 第63页 |
| 1.6 免疫印迹 | 第63-64页 |
| 2 结果 | 第64-66页 |
| 2.1 免疫荧光检测CK2α干扰后EMT相关蛋白的定位及表达情况 | 第64-65页 |
| 2.2 免疫印迹方法检测CK2α干扰后EMT相关蛋白表达的变化 | 第65-66页 |
| 2.3 免疫印迹方法检测增殖相关蛋白的变化 | 第66页 |
| 3 讨论 | 第66-69页 |
| 参考文献 | 第69-72页 |
| 全文小结 | 第72-73页 |
| 中英文缩略语对照表 | 第73-74页 |
| 攻读硕士学位期间发表的文章 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-77页 |
| 统计学审稿证明 | 第77页 |
