| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7页 |
| 缩略词表 | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第9-21页 |
| 1.1 课题提出 | 第9-10页 |
| 1.2 柑橘的遗传转化研究进展 | 第10-13页 |
| 1.2.1 柑橘遗传转化方法 | 第10页 |
| 1.2.2 柑橘遗传转化基因类型 | 第10-12页 |
| 1.2.3 柑橘遗传转化的影响因素 | 第12-13页 |
| 1.3 柑橘抗旱研究进展 | 第13-20页 |
| 1.3.1 植物形态结构上对干旱胁迫的适应 | 第13-14页 |
| 1.3.2 植物生理生化上对干旱胁迫的适应 | 第14-15页 |
| 1.3.3 植物分子水平上对干旱胁迫的适应 | 第15-20页 |
| 1.4 本实验的目的及意义 | 第20-21页 |
| 2 材料和方法 | 第21-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-23页 |
| 2.1.1 植物受体材料 | 第21页 |
| 2.1.2 载体和农杆菌菌株 | 第21页 |
| 2.1.3 培养基配方 | 第21-22页 |
| 2.1.4 主要试剂与仪器 | 第22-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-31页 |
| 2.2.1 根癌农杆菌侵染液的准备 | 第23页 |
| 2.2.2 根癌农杆菌介导的枳类遗传转化 | 第23-24页 |
| 2.2.3 质粒DNA的提取 | 第24页 |
| 2.2.4 柑橘基因组DNA的提取 | 第24-26页 |
| 2.2.5 PCR检测 | 第26-27页 |
| 2.2.6 柑橘总RNA的提取 | 第27-28页 |
| 2.2.7 转基因柑橘real-time PCR分析 | 第28页 |
| 2.2.8 相对失水率的测定 | 第28-29页 |
| 2.2.9 相对电导率的测定 | 第29页 |
| 2.2.10 台盼蓝(trypan blue)染色 | 第29页 |
| 2.2.11 氯化硝基四氮唑兰(NBT)染色 | 第29页 |
| 2.2.12 二氨基联苯胺(DAB)染色 | 第29-31页 |
| 3 结果分析 | 第31-38页 |
| 3.1 枳与早实枳的转化与再生 | 第31页 |
| 3.2 转基因植株的PCR鉴定 | 第31-33页 |
| 3.2.1 PtrABF转早实枳的PCR鉴定 | 第31-32页 |
| 3.2.2 PtrABF转枳的PCR鉴定 | 第32页 |
| 3.2.3 PtCDPK转早实枳的PCR鉴定 | 第32-33页 |
| 3.2.4 PtCDPK转枳的PCR鉴定 | 第33页 |
| 3.3 转基因植株Real time-PCR分析 | 第33-34页 |
| 3.4 PtrABF转早实枳干旱脱水处理 | 第34-35页 |
| 3.5 PtrABF转早实枳的相对失水率的测定 | 第35-36页 |
| 3.6 PtrABF转早实枳的电导率的测定 | 第36-37页 |
| 3.7 PtrABF转早实枳脱水处理后细胞活性检测 | 第37页 |
| 3.8 PtrABF转早实枳脱水处理后ROS积累检测 | 第37-38页 |
| 4 讨论 | 第38-41页 |
| 参考文献 | 第41-50页 |
| 图版及说明 | 第50-53页 |
| 致谢 | 第53页 |
