| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-20页 |
| 1.1 大豆异黄酮介绍 | 第10-14页 |
| 1.1.1 大豆异黄酮的组成和结构 | 第10-11页 |
| 1.1.2 大豆异黄酮的理化性质 | 第11页 |
| 1.1.3 大豆异黄酮的吸收代谢 | 第11-12页 |
| 1.1.4 大豆异黄酮的作用 | 第12-13页 |
| 1.1.5 大豆异黄酮的水解 | 第13-14页 |
| 1.2 β-固定化酶简介 | 第14-16页 |
| 1.2.1 β-葡萄糖苷酶的来源 | 第14-15页 |
| 1.2.2 β-葡萄糖苷酶酶活测定方法 | 第15页 |
| 1.2.3 β-葡萄糖苷酶的应用 | 第15-16页 |
| 1.3 固定化酶 | 第16-18页 |
| 1.3.1 酶的固定化方法 | 第17-18页 |
| 1.3.2 固定化β-葡萄糖苷酶研究进展 | 第18页 |
| 1.4 研究意义和主要研究内容 | 第18-20页 |
| 第2章 β-葡萄糖苷酶的固定化研究 | 第20-33页 |
| 2.1 材料 | 第20-23页 |
| 2.1.1 菌株 | 第20页 |
| 2.1.2 培养基配方 | 第20页 |
| 2.1.3 缓冲液与溶液配方 | 第20-22页 |
| 2.1.4 实验试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.5 实验器材 | 第23页 |
| 2.2 方法 | 第23-26页 |
| 2.2.1 菌株活化培养 | 第23页 |
| 2.2.2 诱导培养 | 第23-24页 |
| 2.2.3 酶的纯化 | 第24页 |
| 2.2.4 蛋白含量的测定(Bradford法) | 第24页 |
| 2.2.5 酶活的测定和计算 | 第24-25页 |
| 2.2.6 酶的固定化方法 | 第25-26页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第26-31页 |
| 2.3.1 对硝基苯酚标准曲线 | 第26-27页 |
| 2.3.2 蛋白(BSA)浓度标准曲线 | 第27页 |
| 2.3.3 重组β-葡萄糖苷酶的诱导表达及纯化 | 第27-28页 |
| 2.3.4 β-葡萄糖苷酶的固定化条件的确定 | 第28-31页 |
| 2.3.5 β-葡萄糖苷酶的酶活及固定化β-葡萄糖苷酶的酶活回收率 | 第31页 |
| 2.4 结论 | 第31-33页 |
| 第3章 固定化β-葡萄糖苷酶的酶学性质研究 | 第33-38页 |
| 3.1 材料 | 第33-34页 |
| 3.1.1 试剂 | 第33页 |
| 3.1.2 仪器 | 第33页 |
| 3.1.3 缓冲液配方 | 第33-34页 |
| 3.2 方法 | 第34页 |
| 3.2.1 制备固定化β-葡萄糖苷 | 第34页 |
| 3.2.2 固定化酶和游离酶的酶学性质研究 | 第34页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第34-37页 |
| 3.3.1 固定化酶和游离酶的最适反应pH | 第34-35页 |
| 3.3.2 固定化酶和游离酶的最适反应温度 | 第35-36页 |
| 3.3.3 固定化酶和游离酶的热稳定性 | 第36页 |
| 3.3.4 游离和固定化酶的贮存稳定性 | 第36-37页 |
| 3.4 结论 | 第37-38页 |
| 第4章 固定化β-葡萄糖苷酶转化大豆异黄酮的研究 | 第38-52页 |
| 4.1 材料 | 第38-39页 |
| 4.1.1 试剂 | 第38-39页 |
| 4.1.2 仪器 | 第39页 |
| 4.1.3 缓冲液配方 | 第39页 |
| 4.2 方法 | 第39-45页 |
| 4.2.1 大豆异黄酮的HPLC检测 | 第39-42页 |
| 4.2.2 制备固定化β-葡萄糖苷 | 第42页 |
| 4.2.3 固定化酶水解大豆异黄酮的反应进程 | 第42-43页 |
| 4.2.4 不同表面活性剂对固定化酶水解体系影响的研究 | 第43页 |
| 4.2.5 不同浓度Triton X-114对水解体系的影响 | 第43-44页 |
| 4.2.6 不同底物浓度对水解体系的影响 | 第44页 |
| 4.2.7 不同酶量对水解体系的影响 | 第44页 |
| 4.2.8 正交试验优化大豆异黄酮水解体系 | 第44页 |
| 4.2.9 优化体系中固定化酶重复批次 | 第44-45页 |
| 4.2.10 与市售酶的比较 | 第45页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第45-51页 |
| 4.3.1 固定化酶水解大豆异黄酮的反应 | 第45-46页 |
| 4.3.2 不同表面活性剂对固定化酶转化体系的影响 | 第46-47页 |
| 4.3.3 不同浓度Triton X-114对水解体系的影响 | 第47-48页 |
| 4.3.4 底物不同浓度对水解体系的影响 | 第48页 |
| 4.3.5 不同固定化酶用量对水解体系的影响 | 第48-49页 |
| 4.3.6 正交试验优化大豆异黄酮水解体系 | 第49-50页 |
| 4.3.7 固定化酶在转化体系中的操作稳定性 | 第50-51页 |
| 4.3.8 市售酶与重组酶的比较 | 第51页 |
| 4.4 结论 | 第51-52页 |
| 第5章 结论与展望 | 第52-53页 |
| 5.1 全文总结 | 第52页 |
| 5.1.1 β-葡萄糖苷酶的制备及其固定化条件优化 | 第52页 |
| 5.1.2 固定化酶和游离酶的酶学性质研究 | 第52页 |
| 5.1.3 固定化β-葡萄糖苷酶转化大豆异黄酮的研究 | 第52页 |
| 5.2 展望 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 附录1 大豆苷和大豆素的高效液相色谱分析图 | 第58-59页 |
| 附录2 染料木苷和染料木素的高效液相色谱分析图 | 第59-60页 |
| 附录3 黄豆黄苷和黄豆黄素的高效液相色谱分析图 | 第60-61页 |
| 附录4 大豆异黄酮混合物的高效液相色谱分析图 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 科研成果 | 第63页 |
