| 中文摘要 | 第4-8页 |
| Abstract | 第8-12页 |
| 缩略语 | 第16-17页 |
| 前言 | 第17-20页 |
| 研究现状、成果 | 第17-19页 |
| 研究目的、方法 | 第19-20页 |
| 一、缺氧诱导黑色素瘤细胞发生老化 | 第20-37页 |
| 1.1 对象和方法 | 第20-26页 |
| 1.1.1 实验动物及细胞系 | 第20页 |
| 1.1.2 移植瘤模型构建 | 第20-21页 |
| 1.1.3 常规石蜡包埋 | 第21页 |
| 1.1.4 细胞老化β-半乳糖苷酶染色 | 第21-22页 |
| 1.1.5 免疫组织化学染色 | 第22-23页 |
| 1.1.6 组织缺氧探针染色方法 | 第23页 |
| 1.1.7 体外缺氧模型的建立 | 第23页 |
| 1.1.8 Western Blot | 第23-24页 |
| 1.1.9 流式细胞仪凋亡检测 | 第24页 |
| 1.1.10 流式细胞仪细胞周期检测 | 第24-25页 |
| 1.1.11 逆转录(RT)及聚合酶链式反应(PCR) | 第25-26页 |
| 1.1.12 统计学方法 | 第26页 |
| 1.2 结果 | 第26-33页 |
| 1.2.1 老化细胞发生于肿瘤坏死边缘并处于缺氧微环境 | 第26-28页 |
| 1.2.2 体外缺氧模型可诱导细胞老化 | 第28-32页 |
| 1.2.3 缺氧处理对HIF-1α表达变化影响 | 第32-33页 |
| 1.3 讨论 | 第33-36页 |
| 1.4 小结 | 第36-37页 |
| 二、老化细胞调节肿瘤微环境 | 第37-54页 |
| 2.1 对象和方法 | 第37-42页 |
| 2.1.1 明胶酶谱法测定基质金属蛋白酶活性 | 第37-38页 |
| 2.1.2 三维培养 | 第38页 |
| 2.1.3 侵袭实验 | 第38-39页 |
| 2.1.4 图像分析 | 第39页 |
| 2.1.5 病例来源及特征 | 第39-42页 |
| 2.1.6 石蜡切片制备 | 第42页 |
| 2.1.7 统计学方法 | 第42页 |
| 2.2 结果 | 第42-49页 |
| 2.2.1 老化细胞的MMP-2表达和活性增高 | 第42-45页 |
| 2.2.2 老化细胞培养基促进肿瘤细胞侵袭、内皮细胞迁移和塑形能力 | 第45-49页 |
| 2.3 讨论 | 第49-53页 |
| 2.3.1 老化细胞分泌表型对肿瘤的影响 | 第49-51页 |
| 2.3.2 坏死/溃疡作为人黑色素瘤的独立预后因素的意义 | 第51-52页 |
| 2.3.3 肿瘤微环境对肿瘤发生发展的影响 | 第52-53页 |
| 2.4 小结 | 第53-54页 |
| 三、成纤维细胞老化对黑色素瘤的影响 | 第54-69页 |
| 3.1 对象和方法 | 第54-56页 |
| 3.1.1 小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养 | 第54页 |
| 3.1.2 黑色素瘤细胞和MEF共培养 | 第54页 |
| 3.1.3 酶联免疫吸附实验 | 第54-55页 |
| 3.1.4 免疫荧光 | 第55-56页 |
| 3.1.5 小鼠荷瘤模型 | 第56页 |
| 3.1.6 细胞增殖实验 | 第56页 |
| 3.2 结果 | 第56-63页 |
| 3.2.1 胚胎成纤维细胞促进黑色素瘤生长 | 第56-58页 |
| 3.2.2 黑色素瘤组织中成纤维细胞发生老化 | 第58-60页 |
| 3.2.3 老化的成纤维细胞促进黑色素瘤组织炎症反应 | 第60-63页 |
| 3.3 讨论 | 第63-68页 |
| 3.3.1 肿瘤实质与间质相互作用对肿瘤的影响 | 第63-65页 |
| 3.3.2 肿瘤间质老化的意义 | 第65-66页 |
| 3.3.3 肿瘤与炎症 | 第66-68页 |
| 3.4 小结 | 第68-69页 |
| 全文结论 | 第69-71页 |
| 论文创新点 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-87页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第87-88页 |
| 综述 细胞老化在肿瘤进展中的作用 | 第88-106页 |
| 综述参考文献 | 第97-106页 |
| 致谢 | 第106页 |
