致谢 | 第5-6页 |
中文摘要 | 第6-9页 |
Abstract | 第9-12页 |
英文缩略语 | 第13-15页 |
目录 | 第15-17页 |
第一部分 温石棉及其替代品致Met-5A细胞和BEAS-2B细胞的毒性作用 | 第17-59页 |
1.1 引言 | 第17-20页 |
1.2. 材料与方法 | 第20-32页 |
1.2.1 主要材料 | 第20页 |
1.2.2 主要试剂 | 第20-21页 |
1.2.3 溶液配制 | 第21-24页 |
1.2.4 仪器设备 | 第24页 |
1.2.5 实验方法与内容 | 第24-32页 |
1.3 结果 | 第32-51页 |
1.3.1 RCF1、GW1、RW1和CF刺激后BEAS-2B和Met-5A细胞的活力 | 第32-33页 |
1.3.2 RCF1、GW1、RW1和CF致BEAS-2B细胞和Met-5A细胞的形态学改变 | 第33-34页 |
1.3.3 RCF1、GW1、RW1和CF致BEAS-2B细胞和Met-5A细胞DNA的损伤 | 第34-39页 |
1.3.4 YO-PRO-1和PI联合染色定量检测细胞凋亡 | 第39-42页 |
1.3.5 荧光探针DCFH-DA检测细胞内ROS的产生 | 第42-43页 |
1.3.6 DHR123检测细胞线粒体内ROS水平 | 第43-45页 |
1.3.7 PARP-1、APE/Ref-1、caspase-3和caspase-9基因mRNA表达水平 | 第45-48页 |
1.3.8 PARP-1、APE/Ref-1、caspase-3和caspase-9蛋白表达水平 | 第48-49页 |
1.3.9 抗氧化剂NAC对细胞DNA损伤、凋亡和ROS的抑制作用 | 第49-51页 |
1.4 讨论 | 第51-59页 |
第二部分 PARP-1和APE/Ref-1缺陷细胞株的构建 | 第59-79页 |
2.1 引言 | 第59-61页 |
2.2 材料与方法 | 第61-68页 |
2.2.1 主要材料 | 第61-62页 |
2.2.2 实验方法 | 第62-68页 |
2.3 研究结果 | 第68-73页 |
2.3.1 质粒阳性克隆鉴定 | 第68页 |
2.3.2 慢病毒滴度测定 | 第68-69页 |
2.3.3 目的细胞转染效率 | 第69-70页 |
2.3.4 PARP-1敲除和APE/Ref-1敲除慢病毒载体效能鉴定 | 第70-73页 |
2.4 讨论 | 第73-79页 |
第三部分 PARP-1和APE/Ref-1抑制在温石棉及其替代品致细胞损伤中的作用 | 第79-89页 |
3.1 引言 | 第79-81页 |
3.2 材料与方法 | 第81-82页 |
3.3 研究结果 | 第82-86页 |
3.3.1 细胞活力测定 | 第82-83页 |
3.3.2 PARP-1和APE/Ref-1在温石棉及替代品致细胞凋亡中的作用 | 第83-84页 |
3.3.3 PARP-1和APE/Ref-1在温石棉及替代品致细胞DNA损伤中作用 | 第84-86页 |
3.4 讨论 | 第86-89页 |
参考文献 | 第89-99页 |
综述 | 第99-118页 |
参考文献 | 第109-118页 |
作者简历及在读期间所取得的科研成果 | 第118页 |