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西农萨能奶山羊LXRα基因的克隆、序列分析及表达研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-13页
第一章 文献综述第13-25页
   ·选题背景第13-14页
     ·西农萨能奶山羊选育研究现状第13页
     ·山羊奶的营养价值第13-14页
     ·乳腺脂肪酸调控相关基因第14页
   ·核受体概述第14-15页
   ·肝 X 受体 α(Liver X receptor α, LXRα)概述第15-21页
     ·LXRα的发现与分布第15页
     ·LXRα的结构、分型第15页
     ·LXRα调控靶基因的转录活化第15-16页
     ·LXRα调控的靶基因第16-17页
     ·LXRα配体激动剂第17-18页
     ·LXRα的生理功能研究第18-21页
   ·生物信息学第21-22页
     ·新基因预测第21页
     ·基因功能预测第21页
     ·蛋白质结构预测及方法第21-22页
     ·蛋白质功能预测及方法第22页
   ·实时荧光定量PCR 技术第22-24页
     ·实时荧光定量PCR 原理第22-23页
     ·实时荧光定量PCR 技术应用及分类第23页
     ·实时荧光定量PCR 特点第23-24页
   ·本研究的目的及意义第24-25页
第二章 西农萨能奶山羊LXRα基因克隆及生物信息学分析第25-46页
   ·材料与方法第25-33页
     ·材料第25-26页
     ·方法第26-33页
   ·结果与分析第33-42页
     ·西农萨能奶山羊乳腺总RNA 的提取第33页
     ·西农萨能奶山羊乳腺LXRα基因CDS 区的克隆第33-34页
     ·目的片段的纯化、载体连接第34页
     ·酶切鉴定、测序第34页
     ·LXRα 基因 3'UTR 和 5'UTR 的克隆第34-35页
     ·LXRα基因全长cDNA 序列拼接第35页
     ·LXRα基因生物信息学分析第35-42页
   ·讨论第42-45页
     ·关于未知基因的获得第42-43页
     ·反转录RT-PCR 及常规PCR 的应用第43页
     ·关于 3′RACE、5’RACE 试验的讨论第43-44页
     ·关于LXRα基因与其他物种LXRα基因的相似性分析第44页
     ·关于LXRα各结构域的功能分析第44-45页
     ·对LXRα蛋白功能预测第45页
   ·小结第45-46页
第三章 西农萨能奶山羊LXRα基因组织表达差异分析第46-54页
   ·材料与方法第46-49页
     ·材料第46-47页
     ·方法第47-49页
   ·结果与分析第49-51页
     ·RNA 提取结果第49-50页
     ·西农萨能奶山羊LXRα基因的组织表达分析第50-51页
   ·讨论第51-52页
     ·关于组织RNA 提取的完整性第51页
     ·关于实时定量荧光PCR SYBR greenI 方法的讨论第51-52页
     ·LXRα基因的研究意义第52页
   ·小结第52-54页
第四章 激动剂TO901317 对乳腺上皮细胞LXRα, LPL, FASN 基因表达的影响第54-68页
   ·材料与方法第54-58页
     ·材料第54-55页
     ·方法第55-58页
   ·结果与分析第58-65页
     ·LXRα激动剂TO901317 对西农萨能奶山羊乳腺上皮细胞活性的影响第58页
     ·RNA 提取结果第58-59页
     ·LPL、FASN 基因引物特异性检测结果第59页
     ·LXRα、FASN、LPL、GAPDH 基因反应产物溶解曲线第59页
     ·激动剂(TO901317)不同浓度及不同时间处理对西农萨能奶山羊乳腺上皮细胞LXRα、FASN 及LPL 基因mRNA 表达的影响第59-62页
     ·乳腺上皮细胞中脂肪酸含量的测定第62-65页
   ·讨论第65-68页
     ·LXRα在脂肪酸合成中的作用第65页
     ·FASN 基因在LXRα激动剂诱导下的表达作用第65-66页
     ·LPL 基因在LXRα激动剂诱导下的表达作用第66-67页
     ·关于LXRα基因激动剂的选择第67页
     ·关于处理细胞的选择第67-68页
第五章 结论第68-69页
参考文献第69-77页
附录第77-78页
致谢第78-79页
作者简介第79页

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