摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
英文缩略表 | 第12-13页 |
第一章 引言 | 第13-21页 |
1.1 叶绿素与光合作用的关系 | 第13页 |
1.2 叶绿素生物合成途径及相关酶基因的克隆 | 第13-16页 |
1.2.1 从L-谷氨酰-tRNA到原卟啉Ⅸ(Proto Ⅸ)的生物合成 | 第15-16页 |
1.2.2 原卟啉Ⅸ(ProtoⅨ)到叶绿素的生物合成 | 第16页 |
1.3 叶绿素生物合成的调控 | 第16-17页 |
1.3.1 ALA合成的调节 | 第16-17页 |
1.3.2 Mg-Proto Ⅸ合成的调节 | 第17页 |
1.4 影响叶绿素生物合成的因素 | 第17-19页 |
1.4.1 光对叶绿素生物合成的影响 | 第17-18页 |
1.4.2 营养元素对叶绿素生物合成的影响 | 第18页 |
1.4.3 温度对叶绿素生物合成的影响 | 第18页 |
1.4.4 水对叶绿素生物合成的影响 | 第18-19页 |
1.5 叶绿素含量对苹果品质的影响 | 第19页 |
1.6 叶绿素合成关键酶基因HEMA | 第19-20页 |
1.7 本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
第二章 材料与方法 | 第21-30页 |
2.1 试验材料 | 第21-23页 |
2.1.1 植物材料及处理 | 第21页 |
2.1.2 主要试验试剂 | 第21页 |
2.1.3 实验设备 | 第21页 |
2.1.4 菌株 | 第21-22页 |
2.1.5 PCR引物 | 第22页 |
2.1.6 培养基 | 第22-23页 |
2.1.7 抗生素浓度 | 第23页 |
2.2 试验方法 | 第23-30页 |
2.2.1 苹果套袋 | 第23页 |
2.2.2 果袋光谱测定 | 第23页 |
2.2.3 果实色泽测定 | 第23页 |
2.2.4 其他生理指标的检测 | 第23页 |
2.2.5 生物信息学 | 第23-24页 |
2.2.6 植物总RNA提取 | 第24页 |
2.2.7 反转录合成cDNA第一条链 | 第24-25页 |
2.2.8 PCR反应 | 第25页 |
2.2.9 回收PCR产物 | 第25页 |
2.2.10 连接反应 | 第25-26页 |
2.2.11 热击法转化大肠杆菌 | 第26页 |
2.2.12 质粒DNA的提取 | 第26页 |
2.2.13 质粒DNA的酶切 | 第26-27页 |
2.2.14 pRI101-MdHEMA1表达载体的构建 | 第27页 |
2.2.15 根癌农杆菌感受态的制备 | 第27页 |
2.2.16 液氮冷冻法转化根瘤农杆菌 | 第27-28页 |
2.2.17 根癌农杆菌介导转化番茄 | 第28页 |
2.2.18 番茄继代培养 | 第28页 |
2.2.19 植物基因组DNA的提取 | 第28-29页 |
2.2.20 转基因番茄的筛选 | 第29页 |
2.2.21 荧光定量PCR | 第29页 |
2.2.22 数据处理 | 第29-30页 |
第三章 结果与分析 | 第30-45页 |
3.1 不同颜色果袋对苹果色泽和品质的影响 | 第30-34页 |
3.1.1 不同颜色果袋对透光光谱的影响 | 第30页 |
3.1.2 不同透光率果袋对‘金冠’苹果果实色泽的影响 | 第30-31页 |
3.1.3 不同颜色果袋对果皮叶绿素含量的影响 | 第31页 |
3.1.4 果实成熟期叶绿素合成途径结构基因的表达情况 | 第31-32页 |
3.1.5 不同颜色果袋对果实可溶性固形物含量的影响 | 第32-33页 |
3.1.6 不同颜色果袋对果实Vc含量的影响 | 第33页 |
3.1.7 不同颜色果袋对果实可滴定酸含量的影响 | 第33-34页 |
3.2 MdHEMA1生物信息学分析 | 第34-38页 |
3.2.1 苹果MdHEMA1基因结构分析 | 第34-35页 |
3.2.2 苹果MdHEMA1保守结构域分析 | 第35-36页 |
3.2.3 苹果MdHEMA1蛋白进化树分析 | 第36-37页 |
3.2.8 苹果MdHEMA1启动子序列分析 | 第37-38页 |
3.3 MdHEMA1表达分析 | 第38-40页 |
3.3.1 MdHEMA1在苹果各组织中的表达分析 | 第38页 |
3.3.2 苹果MdHEMA1在不同发育状态叶片中的表达分析 | 第38-39页 |
3.3.3 MdHEMA1在苹果果实不同发育期的表达分析 | 第39页 |
3.3.4 PEG诱导条件下的表达分析 | 第39-40页 |
3.4 MdHEMA1表达载体的构建和功能验证 | 第40-45页 |
3.4.1 MdHEMA1基因的克隆 | 第40-41页 |
3.4.2 MdHEMA1植物表达载体的构建 | 第41页 |
3.4.3 根癌农杆菌中植物表达载体的PCR反应 | 第41-42页 |
3.4.4 pRI-MdHEMA1转基因番茄鉴定 | 第42-43页 |
3.4.5 转基因番茄中调控叶绿素合成基因的相对表达量 | 第43-45页 |
第四章 讨论 | 第45-48页 |
4.1 不同颜色果袋对苹果果皮叶绿素合成和品质的影响 | 第45-46页 |
4.1.1 套袋处理对苹果果皮叶绿素合成的影响 | 第45页 |
4.1.2 不同颜色果袋处理对果实内在品质的影响 | 第45-46页 |
4.2 MdHEMA1表达分析和功能验证 | 第46-48页 |
第五章 全文结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
作者简历 | 第56页 |