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苹果叶绿素合成关键酶基因MdHEMA1克隆和功能验证

摘要第6-7页
Abstract第7-8页
英文缩略表第12-13页
第一章 引言第13-21页
    1.1 叶绿素与光合作用的关系第13页
    1.2 叶绿素生物合成途径及相关酶基因的克隆第13-16页
        1.2.1 从L-谷氨酰-tRNA到原卟啉Ⅸ(Proto Ⅸ)的生物合成第15-16页
        1.2.2 原卟啉Ⅸ(ProtoⅨ)到叶绿素的生物合成第16页
    1.3 叶绿素生物合成的调控第16-17页
        1.3.1 ALA合成的调节第16-17页
        1.3.2 Mg-Proto Ⅸ合成的调节第17页
    1.4 影响叶绿素生物合成的因素第17-19页
        1.4.1 光对叶绿素生物合成的影响第17-18页
        1.4.2 营养元素对叶绿素生物合成的影响第18页
        1.4.3 温度对叶绿素生物合成的影响第18页
        1.4.4 水对叶绿素生物合成的影响第18-19页
    1.5 叶绿素含量对苹果品质的影响第19页
    1.6 叶绿素合成关键酶基因HEMA第19-20页
    1.7 本研究的目的和意义第20-21页
第二章 材料与方法第21-30页
    2.1 试验材料第21-23页
        2.1.1 植物材料及处理第21页
        2.1.2 主要试验试剂第21页
        2.1.3 实验设备第21页
        2.1.4 菌株第21-22页
        2.1.5 PCR引物第22页
        2.1.6 培养基第22-23页
        2.1.7 抗生素浓度第23页
    2.2 试验方法第23-30页
        2.2.1 苹果套袋第23页
        2.2.2 果袋光谱测定第23页
        2.2.3 果实色泽测定第23页
        2.2.4 其他生理指标的检测第23页
        2.2.5 生物信息学第23-24页
        2.2.6 植物总RNA提取第24页
        2.2.7 反转录合成cDNA第一条链第24-25页
        2.2.8 PCR反应第25页
        2.2.9 回收PCR产物第25页
        2.2.10 连接反应第25-26页
        2.2.11 热击法转化大肠杆菌第26页
        2.2.12 质粒DNA的提取第26页
        2.2.13 质粒DNA的酶切第26-27页
        2.2.14 pRI101-MdHEMA1表达载体的构建第27页
        2.2.15 根癌农杆菌感受态的制备第27页
        2.2.16 液氮冷冻法转化根瘤农杆菌第27-28页
        2.2.17 根癌农杆菌介导转化番茄第28页
        2.2.18 番茄继代培养第28页
        2.2.19 植物基因组DNA的提取第28-29页
        2.2.20 转基因番茄的筛选第29页
        2.2.21 荧光定量PCR第29页
        2.2.22 数据处理第29-30页
第三章 结果与分析第30-45页
    3.1 不同颜色果袋对苹果色泽和品质的影响第30-34页
        3.1.1 不同颜色果袋对透光光谱的影响第30页
        3.1.2 不同透光率果袋对‘金冠’苹果果实色泽的影响第30-31页
        3.1.3 不同颜色果袋对果皮叶绿素含量的影响第31页
        3.1.4 果实成熟期叶绿素合成途径结构基因的表达情况第31-32页
        3.1.5 不同颜色果袋对果实可溶性固形物含量的影响第32-33页
        3.1.6 不同颜色果袋对果实Vc含量的影响第33页
        3.1.7 不同颜色果袋对果实可滴定酸含量的影响第33-34页
    3.2 MdHEMA1生物信息学分析第34-38页
        3.2.1 苹果MdHEMA1基因结构分析第34-35页
        3.2.2 苹果MdHEMA1保守结构域分析第35-36页
        3.2.3 苹果MdHEMA1蛋白进化树分析第36-37页
        3.2.8 苹果MdHEMA1启动子序列分析第37-38页
    3.3 MdHEMA1表达分析第38-40页
        3.3.1 MdHEMA1在苹果各组织中的表达分析第38页
        3.3.2 苹果MdHEMA1在不同发育状态叶片中的表达分析第38-39页
        3.3.3 MdHEMA1在苹果果实不同发育期的表达分析第39页
        3.3.4 PEG诱导条件下的表达分析第39-40页
    3.4 MdHEMA1表达载体的构建和功能验证第40-45页
        3.4.1 MdHEMA1基因的克隆第40-41页
        3.4.2 MdHEMA1植物表达载体的构建第41页
        3.4.3 根癌农杆菌中植物表达载体的PCR反应第41-42页
        3.4.4 pRI-MdHEMA1转基因番茄鉴定第42-43页
        3.4.5 转基因番茄中调控叶绿素合成基因的相对表达量第43-45页
第四章 讨论第45-48页
    4.1 不同颜色果袋对苹果果皮叶绿素合成和品质的影响第45-46页
        4.1.1 套袋处理对苹果果皮叶绿素合成的影响第45页
        4.1.2 不同颜色果袋处理对果实内在品质的影响第45-46页
    4.2 MdHEMA1表达分析和功能验证第46-48页
第五章 全文结论第48-49页
参考文献第49-55页
致谢第55-56页
作者简历第56页

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