| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 缩略语表 | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-19页 |
| 1.1 油菜细胞核雄性不育概述 | 第9页 |
| 1.2 花药结构及相关基因的表达调控 | 第9-15页 |
| 1.2.1 植物花药的发育及小孢子形成 | 第10-11页 |
| 1.2.2 花药发育相关基因的调控网络 | 第11-15页 |
| 1.3 BnCYP704B1基因的研究现状 | 第15-17页 |
| 1.4 酵母单杂交技术在植物中的运用 | 第17-18页 |
| 1.5 研究的意义 | 第18-19页 |
| 2 实验材料与方法 | 第19-28页 |
| 2.1 实验材料 | 第19页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第19页 |
| 2.1.2 菌株及载体 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-28页 |
| 2.2.1 DNA的提取 | 第19-20页 |
| 2.2.2 载体的构建 | 第20-22页 |
| 2.2.3 农杆菌介导的拟南芥遗传转化 | 第22-23页 |
| 2.2.4 转基因植株PCR检测 | 第23页 |
| 2.2.5 GUS染色生化检测 | 第23-24页 |
| 2.2.6 酵母单杂交 | 第24-27页 |
| 2.2.7 突变体筛选及表型观察 | 第27-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-38页 |
| 3.1 BnCYP704B1启动子分析 | 第28-33页 |
| 3.1.1 BnCYP704B1启动子生物信息学分析 | 第28-29页 |
| 3.1.2 BnCYP704B1启动子截短载体的构建 | 第29-31页 |
| 3.1.3 BnCYP704B1缺失载体阳性单株的获得和花蕾GUS化学染色分析 | 第31-32页 |
| 3.1.4 BnCYP704B1核心启动子区段的确定 | 第32-33页 |
| 3.2 BnCYP704B1启动子元件的酵母单杂分析 | 第33-36页 |
| 3.2.1 报告载体Pro45-AbAi、Pro59-AbAi的构建 | 第33页 |
| 3.2.2 AbA抑制Pro45-AbAi、Pro59-AbAi、P53-AbAi自激活浓度测定 | 第33-34页 |
| 3.2.3 油菜花蕾cDNA文库的构建和初步筛选 | 第34-35页 |
| 3.2.4 转录因子与诱饵菌株Pro45-AbAi点对点验证 | 第35-36页 |
| 3.3 转基因突变体的鉴定 | 第36-38页 |
| 4 讨论 | 第38-42页 |
| 4.1 启动子分析的策略 | 第38-39页 |
| 4.2 at4g13640在油菜中的同源基因可能调控BnCYP704B1的表达 | 第39-40页 |
| 4.3 at4g13640突变体表型分析 | 第40页 |
| 4.4 后期工作展望 | 第40-42页 |
| 参考文献 | 第42-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 附录 | 第52-53页 |
| 附录1 酵母单杂交诱饵载体及阳性对照载体示意图及酶切位点 | 第52页 |
| 附录2 酵母文库构建载体pGADT7-Rec及其酶切位点 | 第52-53页 |
| 附录3 BnCYP704B1启动子序列 | 第53页 |
