| 致谢 | 第4-5页 |
| 中文摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 专业名词中英文对照表 | 第12-13页 |
| 1 绪论 | 第13-20页 |
| 1.1 人羊膜上皮细胞与肝病 | 第13页 |
| 1.2 国内外研究现状 | 第13-18页 |
| 1.2.1 人羊膜上皮细胞的分离 | 第13-14页 |
| 1.2.2 人羊膜上皮细胞的培养 | 第14-15页 |
| 1.2.3 人羊膜上皮细胞的冻存 | 第15-16页 |
| 1.2.4 人羊膜上皮细胞的表面标志物 | 第16-17页 |
| 1.2.5 人羊膜上皮细胞向肝样细胞分化 | 第17-18页 |
| 1.3 本研究的目的、内容与研究方法 | 第18-20页 |
| 1.3.1 研究目的 | 第18页 |
| 1.3.2 人羊膜上皮细胞分离培养及冻存工艺的优化 | 第18-19页 |
| 1.3.3 人羊膜上皮细胞生物学特性的研究 | 第19页 |
| 1.3.4 诱导人羊膜上皮细胞向肝样细胞分化 | 第19-20页 |
| 2 人羊膜上皮细胞分离培养冻存工艺及其生物学特性的研究 | 第20-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第20页 |
| 2.1.1 实验标本及其来源 | 第20页 |
| 2.2 主要试剂与仪器设备 | 第20-23页 |
| 2.2.1 实验试剂 | 第20-22页 |
| 2.2.2 实验器械及仪器设备 | 第22页 |
| 2.2.3 试剂配制 | 第22-23页 |
| 2.3 实验方法 | 第23-27页 |
| 2.3.1 实验标本采集 | 第23页 |
| 2.3.2 羊膜上皮细胞分离 | 第23-24页 |
| 2.3.3 羊膜上皮细胞培养 | 第24页 |
| 2.3.4 羊膜上皮细胞传代 | 第24页 |
| 2.3.5 羊膜上皮细胞冻存 | 第24-25页 |
| 2.3.6 羊膜上皮细胞复苏 | 第25页 |
| 2.3.7 活细胞计数 | 第25页 |
| 2.3.8 羊膜上皮细胞生长曲线 | 第25-26页 |
| 2.3.9 免疫荧光染色 | 第26页 |
| 2.3.10 流式细胞仪检测免疫细胞阳性率 | 第26页 |
| 2.3.11 苏木素-伊红染色 | 第26页 |
| 2.3.12 统计学分析 | 第26-27页 |
| 2.4 实验结果 | 第27-36页 |
| 2.4.1 羊膜上皮细胞分离 | 第27-28页 |
| 2.4.2 羊膜上皮细胞培养 | 第28-30页 |
| 2.4.3 羊膜上皮细胞冻存 | 第30-32页 |
| 2.4.4 培养细胞的形态学特征 | 第32-33页 |
| 2.4.5 苏木素-伊红染色 | 第33页 |
| 2.4.6 羊膜上皮细胞生长曲线 | 第33-34页 |
| 2.4.7 免疫荧光染色检测结果 | 第34-35页 |
| 2.4.8 免疫流式细胞检测结果 | 第35页 |
| 2.4.9 流式检测条状统计图 | 第35-36页 |
| 2.5 讨论 | 第36-38页 |
| 2.6 结论 | 第38-40页 |
| 3 人羊膜上皮细胞向肝样细胞诱导分化的研究 | 第40-54页 |
| 3.1 主要试剂和仪器设备 | 第40-42页 |
| 3.1.1 实验试剂 | 第40-41页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第41-42页 |
| 3.2 实验方法 | 第42-45页 |
| 3.2.1 体外肝细胞样细胞诱导体系的建立 | 第42页 |
| 3.2.2 免疫荧光染色 | 第42页 |
| 3.2.3 糖原染色 | 第42页 |
| 3.2.4 总RNA的抽提 | 第42-43页 |
| 3.2.5 总RNA定量与电泳 | 第43页 |
| 3.2.6 逆转录PCR合成cDNA | 第43-44页 |
| 3.2.7 肝细胞关键基因荧光定量PCR反应 | 第44-45页 |
| 3.3 实验结果 | 第45-51页 |
| 3.3.1 羊膜上皮细胞诱导组与对照组细胞形态学观察 | 第46页 |
| 3.3.2 羊膜上皮细胞诱导后的免疫荧光染色 | 第46-48页 |
| 3.3.3 荧光定量RCR检测诱导过程中羊膜上皮细胞的肝细胞特异性基因的表达 | 第48-51页 |
| 3.3.4 羊膜上皮细胞诱导后的糖原染色 | 第51页 |
| 3.4 讨论 | 第51-53页 |
| 3.5 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 附录 | 第59-65页 |
| 作者简介 | 第65页 |
